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高效虾壳脱蛋白菌株的筛选、产酶条件优化及酶学性质研究
作者姓名:宋超东  殷豆豆  谢晨杰  尹凯波  韦玉玲  李林利  黄宏智  张红岩  申乃坤  姜明国
作者单位:广西民族大学海洋与生物技术学院,广西多糖材料与改性重点实验室
基金项目:国家自然科学基金项目 31660022,32060020;广西科技重点研发计划项目 AB21196019,AB21220020;广西民族大学引进人才项目 2018KJQD17;大学生创新创业训练计划课题 202110608014,S202210608164,S202210608156
摘    要:该研究旨在筛选高效虾壳脱蛋白菌株并进行工艺优化及酶学性质研究。先通过单因素、Placket-Burman(PB)和正交优化试验对筛选菌株虾壳脱蛋白工艺优化,进一步对酶学性质和降解产物进行研究。结果表明,菌株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)Gxun-7脱蛋白效果最好;最优产酶条件为:虾壳粉40 g/L,玉米浆5 g/L,接种量1%(体积分数),初始pH 7.0,发酵温度35℃,发酵时间48 h,优化后酶活性达(617.13±22.11) U/mL,较优化前提高了43.50%,此时,虾壳脱蛋白率为(82.61±0.54)%;菌株Gxun-7所产蛋白酶为诱导酶,酶的耐盐性较好,最适温度和pH值分别为60℃和7.0,除Cu2+和Al3+对酶活性有显著抑制外,其他金属离子对酶活影响不大,十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate, SDS)和十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide, CTAB)抑制酶活性超过40%,而β-巯基乙醇却能提高酶活性到468%;降解液中共检测出17种氨基酸,含量达1 856.14 mg/L。因此,Gxun-7对虾壳具有高效脱蛋白能力,所产蛋白酶稳定性强,降解液中氨基酸含量丰富,为虾壳蛋白降解及利用提供理论依据。

关 键 词:虾壳  脱蛋白  铜绿假单胞菌  条件优化  酶学性质  
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