真空提取核桃粕多酚的抗氧化活性研究

目的 探究真空提取的核桃粕(walnut meal)多酚的抗氧化活性。方法 以非真空条件下提取的多酚为对照, 采用超声波辅助真空法提取核桃粕多酚, 用HPD-100型大孔树脂对多酚进行纯化, 福林酚(Folin-Ciocalte)法测定多酚含量, 通过试剂盒检测多酚对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)、超氧阴离子自由基的清除率及Fe3+还原能力(ferric reducing antioxidant power, FRAP)来评价其体外抗氧化活性, 用cck8 (cell counting kit-8)法测定不同浓度的核桃粕多酚对HepG2细胞的毒性作用, 确定3个无毒性作用浓度, 以770 μmol/L的H2O2诱导HepG2细胞建立氧化应激损伤模型, 通过测定HepG2细胞中丙二醛(malonicdialdehyde, MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力、谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量探究12.5、25.0、50.0 μg/mL核桃粕多酚对HepG2细胞氧化损伤的保护作用。结果 真空条件下提取的多酚含量为26.96 mg/g, 比非真空条件下提取的多酚含量高出14.50%; 经HPD-100型大孔树脂纯化后, 对照组和真空组核桃粕多酚纯度分别由22.69%、26.60%提高至73.87%、77.53%; 纯化后, 对照组与真空组多酚质量浓度为0.5 mg/mL时对DPPH自由基的清除率高达93.83%、93.67%, 高于VC的清除率91.03%; 同一浓度范围内，真空条件下提取的核桃粕多酚对超氧阴离子自由基的清除率和FRAP均显著高于对照组多酚(P < 0.05)，其中对照组与真空组多酚质量浓度为1.8 mg/mL时对超氧阴离子自由基的清除率最高分别为72.39%、80.38%，多酚质量浓度浓度为2.0 mg/mL时，对照组与真空组多酚的FRAP分别为8.91、9.92 μmol/L，高于VC的FRAP 7.91 μmol/L; 核桃粕多酚可以使受氧化损伤的HepG2细胞内MDA含量明显减少, 并能提高受氧化损伤细胞内SOD活力及GSH含量。结论 真空条件有利于核桃粕多酚的提取, 提取纯度较高, 纯化后核桃粕多酚具有较好的体外氧化活性, 对HepG2细胞氧化损伤有一定的保护作用

Study on the antioxidant activity of polyphenols from walnut meal extracted by vacuum