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食品检测用产肠毒素大肠埃希氏菌标准物质的制备及评价
引用本文:刘娜,王亚萍,赵琳娜,王学硕,崔生辉.食品检测用产肠毒素大肠埃希氏菌标准物质的制备及评价[J].中国食品卫生杂志,2022,34(2):270-274.
作者姓名:刘娜  王亚萍  赵琳娜  王学硕  崔生辉
作者单位:中国食品药品检定研究院,北京 100050
基金项目:科技部“食品安全关键技术研发”重点专项项目(2018YFC1603904);中国食品药品检定研究院中青年基金(2020C3)
摘    要:目的 制备并评价产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)标准物质。方法 分别用基质辅助激光解吸电离(MALDI-TOF MS)、生化、16 s RNA基因序列测定三种方法确认菌株种属。采用冷冻干燥技术制备600个ETEC标准样品(103 CFU/样品);从中随机抽取20个进行均匀性检验;模拟25 ℃和37 ℃的运输温度测试样品的运输稳定性,同时在4 ℃和-20 ℃的条件下进行保藏稳定性检验。组织 3家实验室对样品进行协同验证。最后选择20件食品基质来验证样品的使用效果。结果 生化、MALDI-TOF MS、16 s RNA基因序列鉴定CMCC(B)43208为大肠埃希氏菌, ltstpsth基因确认其为ETEC。均匀性检验中,单因素方差分析得F=1.48,小于FINV(0.05,19,20)。稳定性检验中,在25 ℃和37 ℃保藏7 d后结果为103 CFU/样品,在-20 ℃保藏60 d和4 ℃保存28 d后结果为103 CFU/样品。协同标定实验中,3 家实验室检测样品中菌株均为ETEC(103 CFU/标准样品)。使用效果评价中,ETEC标准样品加入20种食品基质后均可检出,而本底对照均未检出。结论 本实验制备的ETEC标准样品均匀且稳定,协同验证、食品基质验证实验结果均与预期设置的103 CFU/样品一致,可以作为标准物质使用。

关 键 词:微生物标准物质  产肠毒素大肠埃希氏菌  均匀性  稳定性  应用
收稿时间:2021/11/4 0:00:00

Preparation and evaluation of enterotoxigenic Escherichia coli reference for food testing
LIU N,WANG Yaping,ZHAO Linn,WANG Xueshuo,CUI Shenghui.Preparation and evaluation of enterotoxigenic Escherichia coli reference for food testing[J].Chinese Journal of Food Hygiene,2022,34(2):270-274.
Authors:LIU N  WANG Yaping  ZHAO Linn  WANG Xueshuo  CUI Shenghui
Abstract:
Keywords:Microbial reference  Enterotoxigenic Escherichia coli  uniformity  stability  application
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