| 抗HIV-1 gp120单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控型表达载体构建及表达 |
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| 引用本文： | 王宏,金宁一,金洪涛,张立树,江文正,徐一鸣,连海.抗HIV-1 gp120单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控型表达载体构建及表达[J].高技术通讯,2004,14(11):38-41. |
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| 作者姓名： | 王宏 金宁一 金洪涛 张立树 江文正 徐一鸣 连海 |
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| 作者单位： | 中国人民解放军军需大学军事兽医研究所全军基因工程重点实验室,长春,130062;暨南大学生命科学技术学院,广州,510632;中国人民解放军军需大学军事兽医研究所全军基因工程重点实验室,长春,130062 |
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| 基金项目： | 863计划项目 ( 2 0 0 3AA2 190 5 1)，吉林省重点资助项目 ( 2 0 0 10 40 4) |
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| 摘 要： | 人工合成了能广泛识别HIV—1 gp120的单链抗体(SeFv120)基因和金黄色葡萄菌外毒素A(SEA)基因，将SEA基因第227位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT，并对两基因进行密码子优化。构建原核温控型表达质粒pBV—120和pBV—SL120，经条件优化，pBV—120和pBV—SL120分别在E．coli BL21(DE3)plys中44℃诱导6h、42℃诱导7h获得最佳表达，表达量分别占菌体总蛋白的27．673％和32．519％。目的蛋白经包涵体洗脱、分子筛层析折叠复性后可与HIV—1抗原条发生良好的结合反应。
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| 关 键 词： | HIV gp120 单链抗体 金黄色葡萄菌外毒素A 表达 |
Construction of Temperature Control Prokaryotic Expression Vector and Expression of A Mutated SEA D227A Fusion Single Chain Antibody Specific to HIV-1 gp120 |
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| Wang Hong,Jin Ningyi,Jin Hongtao,Zhang Lishu,Jiang Wenzheng,Xu Yiming.Construction of Temperature Control Prokaryotic Expression Vector and Expression of A Mutated SEA D227A Fusion Single Chain Antibody Specific to HIV-1 gp120[J].High Technology Letters,2004,14(11):38-41. |
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| Authors: | Wang Hong Jin Ningyi Jin Hongtao Zhang Lishu Jiang Wenzheng Xu Yiming |
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| Keywords: | HIV gp120 ScFv Staphylococcus aureus extoxin A expression |
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