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马传染性贫血病毒膜蛋白基因的改造及其在真核细胞中的表达
引用本文:陈新江,孟庆来,毛洁,张晓燕,张耀洲.马传染性贫血病毒膜蛋白基因的改造及其在真核细胞中的表达[J].浙江理工大学学报,2008,25(5).
作者姓名:陈新江  孟庆来  毛洁  张晓燕  张耀洲
作者单位:1. 浙江理工大学生物化学研究所,杭州,310018
2. 中国疾病预防控制中心性病艾滋痛预防与控制中心,北京,100050
基金项目:国家自然科学基金,浙江省科技厅资助项目,国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:以马传染性贫血病毒(equine infectious anemia virus,EIAV)天然膜蛋白基因(gp120)为基础设计的DNA疫苗在马体内的表达量很低,这与密码子使用偏嗜性、RNA剪切位点多和导致RNA不稳定性的腺苷丰富区的大量存在有关.为解决这些问题,合成了EIAV gp120基因(Syn-env),使其密码子偏嗜性符合高水平表达的哺乳动物基因.EIAV弱毒疫苗的制备过程中,出现了几个重要而稳定的N-糖基突变住点,以Syn-env为基础,运用重叠延伸PCR定点突变策略获得了6个具有不同N-糖基缺失组合的gp120基因.将突变后的基因克隆到真核表达载体pVRCSV1.0,然后转染Hela细胞,发现这些重组质粒均获得了表达.进而为比较6种质粒诱导机体免疫保护效果,阐明EIAV弱毒疫苗减毒机理奠定了基础.

关 键 词:马传染性贫血病毒  定点突变  N-糖基化位点  真核表达

Modifications of the EIAV Envelope Glycoprotein and Expression in Hela Cell Line
CHEN Xin-jiang,MENG Qing-lai,MAO Jie,ZHANG Xiao-yan,ZHANG Yao-zhou.Modifications of the EIAV Envelope Glycoprotein and Expression in Hela Cell Line[J].Journal of Zhejiang Sci-tech University,2008,25(5).
Authors:CHEN Xin-jiang  MENG Qing-lai  MAO Jie  ZHANG Xiao-yan  ZHANG Yao-zhou
Abstract:
Keywords:gp120
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