跨越式滚环等温扩增可视化检测羊肉中鸭肉源成分

为可视化检测羊肉中鸭肉源成分，该研究将跨越式滚环等温扩增(Saltatory rolling circle amplification,SRCA)技术与荧光技术相结合，以生长激素(Growth hormone,GH)基因为靶基因分别设计并筛选羊、鸭特异性引物，拟建立可视化SRCA检测方法。对该方法进行特异性、灵敏度和检出限试验。结果显示：山羊和绵羊样品呈现绿色荧光，判定为阳性，13种非羊样品呈现橙黄色荧光，判定为阴性；鸭样品为阳性，14种非鸭样品均为阴性；表明该方法特异性良好。可视化SRCA分别检测羊、鸭DNA的灵敏度均为2.0×101 fg/μL。可视化SRCA检测羊肉中鸭肉源成分的检出限为0.001%(w/w)。对29份市售羊肉样品中鸭肉源成分的检测得知，可视化SRCA法检出率为17.24%，行标NY/T 3309—2018中方法检出率为10.34%。该方法经济、简便，结果肉眼可见，更适用于条件相对落后的实验室或资源相对匮乏的基层检测机构。