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一种5 重real-time PCR筛查转基因水稻方法的建立
作者姓名:董立明  杨帆  邢珍娟  李葱葱  闫伟  龙丽坤  李飞武
作者单位:(吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,吉林 长春 130033)
基金项目:吉林省农业科技创新工程项目(CXGC2017TD011);国家转基因生物新品种培育重大专项(2018ZX08012001)
摘    要:以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5 种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验,建立了5 重real-time PCR方法,灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确、通量大等优点,可实现水稻中转基因成分的快速、高效检测。

关 键 词:转基因水稻  筛查元件  单一实时聚合酶链式反应  5 重实时聚合酶链式反应  高通量检测方法,
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