一种5 重real-time PCR筛查转基因水稻方法的建立 |
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作者姓名: | 董立明 杨帆 邢珍娟 李葱葱 闫伟 龙丽坤 李飞武 |
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作者单位: | (吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,吉林 长春 130033) |
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基金项目: | 吉林省农业科技创新工程项目(CXGC2017TD011);国家转基因生物新品种培育重大专项(2018ZX08012001) |
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摘 要: | 以转基因水稻中最常用的CaMV35S启动子、NOS终止子、Cry1Ab/Ac基因、HPT基因及SPS水稻内标基因为研究对象,利用5 种不同的荧光信号(FAM、HEX、Taxas Red、Cy5、Cy5.5)进行多重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)检测方法的研究。通过引物组合筛选、反应体系优化、特异性测试、灵敏度测试、适用性测试等一系列实验,建立了5 重real-time PCR方法,灵敏度可达0.032%。此方法具有灵敏度高、结果准确、通量大等优点,可实现水稻中转基因成分的快速、高效检测。
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关 键 词: | 转基因水稻 筛查元件 单一实时聚合酶链式反应 5 重实时聚合酶链式反应 高通量检测方法, |
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