利用全基因组改组技术提高SubtilosinA的产量 |
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引用本文: | 袁芳,符雨欣,黄瑶,钟梁,陆兆新,吕凤霞,赵海珍,别小妹.利用全基因组改组技术提高SubtilosinA的产量[J].食品工业科技,2014(22):167-171. |
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作者姓名: | 袁芳 符雨欣 黄瑶 钟梁 陆兆新 吕凤霞 赵海珍 别小妹 |
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作者单位: | 南京农业大学食品科学技术学院 |
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摘 要: | 以Bacillus subtilis nja A1B2-2为出发菌株,在最佳的原生质体形成、再生和融合条件的基础上,将前期经过理化诱变筛选的四株高产菌株进行两轮基因组改组。结果表明,当以0.6mol/L Na Cl为高渗洗涤液,0.1mg/m L溶菌酶酶解40min后,涂布在以SMM为高渗体系的NB再生培养基上,原生质体形成率达到95.49%,再生率为89.25%。优化原生质体的融合条件,融合率达到了1.39×10-3。在此基础上将四株高产Subtilosin A菌株进行两轮全基因组改组,结合双亲灭活的筛选方法,挑选出一株遗传性状稳定的高产菌株R2-264,产量达17.59mg/L,比出发菌株提高了3.58倍。
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关 键 词: | 原生质体 基因组改组 稳定性 |
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