| 丙型肝炎病毒人源单克隆抗体的初步筛选 |
| |
| 引用本文： | 岳磊,李华,杨婷,谢天宏,宋霞,孟华清,张也,谢忠平.丙型肝炎病毒人源单克隆抗体的初步筛选[J].粉末涂料与涂装,2018(3). |
| |
| 作者姓名： | 岳磊 李华 杨婷 谢天宏 宋霞 孟华清 张也 谢忠平 |
| |
| 作者单位： | 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所; |
| |
| 摘 要： | 目的构建天然人源噬菌体抗体库,初步筛选人源抗丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)多肽抗原的单克隆重组噬菌体抗体。方法以健康成人外周血淋巴细胞cDNA为模板,采用PCR技术扩增轻(VL)、重链(VH)可变区基因;重叠PCR法拼接生成单链抗体可变区基因片段(single chain fragment variable,scFv),并克隆至噬菌体载体p CANTAB5e,得到初级抗体库;使用HCV多肽混合抗原,经3轮淘筛富集噬菌体抗体;Phage ELISA法初步筛选HCV重组噬菌体抗体。结果成功构建了天然人源噬菌体抗体库。scFv(VH-κ)库的库容为6.0×10~7 PFU/mL,scFv(VH-λ)库的库容为4.28×10~9 PFU/m L;经初步淘筛,成功获得HCV三级抗体库;Phage ELISA得到了3株候选重组噬菌体抗体。结论初步得到HCV多肽抗原重组噬菌体抗体,为今后进一步筛选高亲和力噬菌体抗体和可溶抗体奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 人源单克隆抗体 噬菌体抗体库 |
Preliminary screening of humanized monoclonal antibodies against hepatitis C virus |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
