| 耐盐性谷氨酰胺酶在Bacillus subtilis 168中的整合表达 |
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| 引用本文： | 徐朝阳,张显,徐美娟,杨套伟,饶志明.耐盐性谷氨酰胺酶在Bacillus subtilis 168中的整合表达[J].食品与生物技术学报,2020,39(6):22-29. |
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| 作者姓名： | 徐朝阳 张显 徐美娟 杨套伟 饶志明 |
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| 作者单位： | 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡 214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122 |
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| 摘 要： | 微生物质粒过表达外源基因,会由于质粒分离稳定性低、种子培养基中需添加抗生素等原因,限制其在工业生产中的应用。为了得到一株可用于工业生产谷氨酰胺酶的菌株,选择食品安全级Bacillus subtilis 168作为宿主,将来源于Micrococcus luteus K-3的编码耐高浓度盐的谷氨酰胺酶基因(Mglu)插入到其染色体上进行整合表达。选择了2个内源性蛋白酶基因作为整合表达位点,通过lox序列的重组消除抗性基因,得到无抗性基因的重组谷氨酰胺酶表达菌株。遗传稳定性研究表明,在不添加抗生素的条件下,通过连续传代重组菌株并测定发酵酶活,发现重组菌株连续传42代时,酶活基本不变。随后,采用5 L发酵罐对重组菌株进行分批补料发酵,最高酶活达到了41.5 U/mL。本研究对提高谷氨酰胺酶重组菌株遗传稳定性提供了借鉴。
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| 关 键 词： | 谷氨酰胺酶 Bacillus subtilis 168 整合表达 蛋白酶 遗传稳定性 |
Over-Expression of Salt-Tolerant Glutaminase by Integration of Mglu Genes in Bacillus subtilis 168 |
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| XU Zhaoyang,ZHANG Xian,XU Meijuan,YANG Taowei,RAO Zhiming.Over-Expression of Salt-Tolerant Glutaminase by Integration of Mglu Genes in Bacillus subtilis 168[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2020,39(6):22-29. |
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| Authors: | XU Zhaoyang ZHANG Xian XU Meijuan YANG Taowei RAO Zhiming |
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| Affiliation: | School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China; Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | glutaminase Bacillus subtilis 168 integration protease genetic stability |
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