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鲤鱼(Cyprinus Carpio) 促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备
引用本文:王蕴,胡炜,汤斌,戴军,汪亚平,朱作言.鲤鱼(Cyprinus Carpio) 促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备[J].高技术通讯,2006,16(6):633-637.
作者姓名:王蕴  胡炜  汤斌  戴军  汪亚平  朱作言
作者单位:1. 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072;中国科学院研究生院,北京,100049
2. 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室,武汉,430072
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划) , 中国科学院资助项目
摘    要:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从鲤鱼脑垂体获得了两种GtH β亚基的cDNA, 克隆在pMD18-T载体.经测序确证后,将这两个基因克隆到原核表达载体pET -32(a)中,转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达.利用初步纯化后的抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.应用制备的兔抗血清与抽提的鲤鱼脑垂体的总蛋白分别进行Western-blot及ELISA分析,结果显示获得的多抗能特异识别各自的天然蛋白.该结果为纯化天然GtH蛋白提供了有效的检测手段,为进一步制备GtH单克隆抗体奠定了基础.

关 键 词:鲤鱼  促性腺激素  基因克隆  原核表达  多克隆抗体
收稿时间:2005-09-06
修稿时间:2005年9月6日

Cloning, expression and polyclonal antibody preparation of two gonadotropin beta subunits cDNAs in the common carp (Cyprinus Carpio)
Wang Yun , Hu Wei , Tang Bin , Dai Jun , Wang Yaping , Zhu Zuoyan.Cloning, expression and polyclonal antibody preparation of two gonadotropin beta subunits cDNAs in the common carp (Cyprinus Carpio)[J].High Technology Letters,2006,16(6):633-637.
Authors:Wang Yun  Hu Wei  Tang Bin  Dai Jun  Wang Yaping  Zhu Zuoyan
Affiliation:1 State Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology, Institute of hydrobiology, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430072;2 Graduate School of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049
Abstract:
Keywords:common carp  gonadotropin  gene cloning  prokaryotic expression  polyclonal antibody
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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