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天门冬酰胺酶基因在黑曲霉中的同源表达
引用本文:韦素真,张会,姚杨,岳苗苗,李杰.天门冬酰胺酶基因在黑曲霉中的同源表达[J].食品与生物技术学报,2015,34(5):554-559.
作者姓名:韦素真  张会  姚杨  岳苗苗  李杰
作者单位:东北农业大学 生命科学学院,黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学 生命科学学院,黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学 生命科学学院,黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学 生命科学学院,黑龙江 哈尔滨 150030,东北农业大学 生命科学学院,黑龙江 哈尔滨 150030
摘    要:根据NCBI中的黑曲霉天门冬酰胺酶基因asp序列(GI:145231287)设计特异性引物,从黑曲霉CICC2462基因组中扩增asp基因编码区,构建其黑曲霉表达载体p SZHG-Asp。通过农杆菌介导法转化黑曲霉,筛选以asp基因置换糖化酶基因gla A的同源重组转化子。对转化子的表达产物进行SDS-PAGE分析和酶活检测。获得8株在gla A位点发生基因置换的同源重组转化子,并对其中4株的上清液进行检测。SDS-PAGE结果显示,在42 000处有目的蛋白质条带,重组菌株的目的蛋白质表达量为185~417μg/m L,发酵液最高酶活为21 111 U/m L。

关 键 词:天门冬酰胺酶  黑曲霉  基因置换  Berthelot显色反应

Homologous Expression of Asparaginase Gene in Aspergillus niger
WEI Suzhen,ZHANG Hui,YAO Yang,YUE Miaomiao and LI Jie.Homologous Expression of Asparaginase Gene in Aspergillus niger[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2015,34(5):554-559.
Authors:WEI Suzhen  ZHANG Hui  YAO Yang  YUE Miaomiao and LI Jie
Affiliation:College of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China,College of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China,College of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China,College of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China and College of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China
Abstract:
Keywords:asparaginase  Aspergillus niger  gene replacement  berthelot colour reaction
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