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内切葡聚糖酶与木聚糖酶在毕赤酵母中的共分泌表达
引用本文:刘高磊,胡蝶,邬敏辰,殷欣,汪俊卿.内切葡聚糖酶与木聚糖酶在毕赤酵母中的共分泌表达[J].食品与生物技术学报,2015,34(3):253-259.
作者姓名:刘高磊  胡蝶  邬敏辰  殷欣  汪俊卿
作者单位:江南大学 药学院,江苏 无锡 214122;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122;江南大学 无锡医学院,江苏 无锡 214122;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122
摘    要:为实现内切葡聚糖酶和木聚糖酶在毕赤酵母中的共分泌表达,进而降低酶制剂的生产成本,构建含木聚糖酶基因的重组表达载体pPICZαA-Aoxyn11A,经SacI线性化后,电转化至含内切葡聚糖酶基因Aucel12A的重组毕赤酵母GSC7中,获得双重重组毕赤酵母GSCX8。经甲醇诱导表达后,GSCX8发酵上清液中内切葡聚糖酶和木聚糖酶的活性分别为47.77IU/mL和192.71IU/mL,为单独表达菌株GSC7和GSX5的85%和80%。酶学性质分析显示,内切葡聚糖酶的最适pH为4.0,在pH3.0~8.5稳定;最适温度为50℃,在60℃以下稳定。木聚糖酶的最适pH为5.5,在pH3.0~10.0稳定;最适温度为55℃,在50℃以下稳定。GSCX8遗传稳定性测试结果表明,内切葡聚糖酶和木聚糖酶在毕赤酵母中实现了稳定的共表达。

关 键 词:内切葡聚糖酶  木聚糖酶  毕赤酵母  共分泌表达

Co-Expression of Endoglucanase and Xylanase in Pichia pastoris
LIU Gaolei,HU Die,WU Minchen,YIN Xin and WANG Junqing.Co-Expression of Endoglucanase and Xylanase in Pichia pastoris[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2015,34(3):253-259.
Authors:LIU Gaolei  HU Die  WU Minchen  YIN Xin and WANG Junqing
Affiliation:School of Pharmaceutics,Jiangnan University,Wuxi 214122,China;School of Biotechnology,Jiangnan University,Wuxi 214122,China;Wuxi Medical School,Jiangnan University,Wuxi 214122,China;School of Biotechnology,Jiangnan University,Wuxi 214122,China;School of Biotechnology,Jiangnan University,Wuxi 214122,China
Abstract:
Keywords:endoglucanase  xylanase  Pichia pastoris  co-expression
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