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表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株的建立
引用本文:于海鹏,刘丹,薛雁,任琦,李娟,富锐丽,李铮,姚为民,盛军.表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株的建立[J].粉末涂料与涂装,2009,22(1).
作者姓名:于海鹏  刘丹  薛雁  任琦  李娟  富锐丽  李铮  姚为民  盛军
作者单位:于海鹏(吉林大学生命科学学院,长春,130012;长春生物制品研究所,长春,130062);刘丹,任琦,李娟,富锐丽,李铮,姚为民,盛军(长春生物制品研究所,长春,130062);薛雁(吉林大学生命科学学院,长春,130012) 
摘    要:目的建立表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株。方法采用PCR方法分别扩增HBsAg及rhIFNα2b基因,以GS linker连接后,克隆入表达质粒pBI121,构建植物细胞表达质粒pBISI,转化农杆菌LBA4404,感染人参愈伤组织细胞。经G418筛选抗性细胞株,提取细胞基因组DNA,进行PCR检测;应用ELISA法检测HBsAg及rhIFNα2b的表达;通过Western blot分析表达蛋白的反应原性。结果重组表达质粒pBISI经酶切鉴定,表明构建正确。筛选得到3株正常生长的人参细胞株,基因组DNA扩增得到约1200bp的融合基因片段;经ELISA检测,其中1株能够表达HBsAg及rhIFNα2b;表达的蛋白与鼠抗HBsAg血清在相对分子质量35000处出现特异条带。结论已获得了表达HBsAg及rhIFNα2b融合蛋白的人参细胞株。

关 键 词:HBsAg  重组人干扰素α2b  融合蛋白  人参细胞
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