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重组酶介导等温扩增法检测食品中铜绿假单胞菌
引用本文:姚丽锋,冯家望,张 娟,黎财慧,丁 琦,张晴阳,严家俊,游淑珠,符家忍,王小玉.重组酶介导等温扩增法检测食品中铜绿假单胞菌[J].食品安全质量检测技术,2022,13(17):5695-5701.
作者姓名:姚丽锋  冯家望  张 娟  黎财慧  丁 琦  张晴阳  严家俊  游淑珠  符家忍  王小玉
作者单位:拱北海关技术中心,拱北海关技术中心,广东产品质量监督检验研究院,拱北海关技术中心,拱北海关技术中心,拱北海关技术中心,广东产品质量监督检验研究院,拱北海关技术中心,拱北海关技术中心,拱北海关技术中心
基金项目:海关总署科研项目(2020HK189);珠海市科技计划项目(ZH22036201210017PWC);珠海进出口公共技术服务平台项目(IETP202101005)
摘    要:目的 建立重组酶介导等温扩增(Recombinase-aided amplification,RAA)法,快速、灵敏、特异检测食品中铜绿假单胞菌的分析方法。方法 针对铜绿假单胞菌lasB基因的特异性保守区域,设计RAA特异性引物和exo探针,筛选出最优组合;对提取的目标基因组DNA进行检测,确定方法的特异性和灵敏度,并通过人工污染实验,比对不同检测方法对食品样品的检出限。结果 建立的铜绿假单胞菌lasB基因RAA检测方法特异性良好,仅对铜绿假单胞菌有扩增曲线,对其他致病菌无交叉反应;方法对纯菌液的灵敏度为1.7 pg/μL。人工污染实验表明,方法对肉类样品中铜绿假单胞菌的检出限与传统方法一致,达1.0×103 CFU/mL;RAA方法检测时间仅需20min。结论 本研究建立的铜绿假单胞菌实时荧光RAA检测方法特异性强、灵敏度高、反应时间短,可用于食品中铜绿假单胞菌的快速检测。

关 键 词:铜绿假单胞菌  LasB基因  重组酶介导等温扩增
收稿时间:2022/6/7 0:00:00
修稿时间:2022/8/29 0:00:00

Detection of Pseudomonas aeruginosa in food by recombinase-aided amplification method
YAO Li-Feng,FENG Jia-Wang,ZHANG Juan,LI Cai-Hui,DING Qi,ZHANG Qing-Yang,YAN Jia-Jun,YOU Shu-Zhu,FU Jia-Ren,WANG Xiao-Yu.Detection of Pseudomonas aeruginosa in food by recombinase-aided amplification method[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2022,13(17):5695-5701.
Authors:YAO Li-Feng  FENG Jia-Wang  ZHANG Juan  LI Cai-Hui  DING Qi  ZHANG Qing-Yang  YAN Jia-Jun  YOU Shu-Zhu  FU Jia-Ren  WANG Xiao-Yu
Affiliation:Technical Center of Gongbei Customs,Technical Center of Gongbei Customs,Guangdong Testing Institute for Product Quality Supervision,Technical Center of Gongbei Customs,Technical Center of Gongbei Customs,Technical Center of Gongbei Customs,Guangdong Testing Institute for Product Quality Supervision,Technical Center of Gongbei Customs,Technical Center of Gongbei Customs,Technical Center of Gongbei Customs
Abstract:
Keywords:Pseudomonas aeruginosa  LasB gene  recombinase-aided amplification
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