| TAT-SOD在长期保藏的重组毕赤酵母中表达的条件优化 |
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| 引用本文： | 李孔翰,陈玲琳,周建森,刘树滔.TAT-SOD在长期保藏的重组毕赤酵母中表达的条件优化[J].食品与生物技术学报,2020,39(8):51-58. |
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| 作者姓名： | 李孔翰 陈玲琳 周建森 刘树滔 |
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| 作者单位： | 福州大学 生物工程研究所，福建 福州 350002 |
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| 摘 要： | TAT-SOD是TAT蛋白转导结构域与SOD的融合蛋白质。作者以2007年构建的产TAT-SOD重组毕赤酵母菌为出发菌株，通过摇瓶实验研究不同温度、初始pH、诱导剂浓度等因素对蛋白质表达的影响。通过比色分析法测定菌体浓度、超氧阴离子自由基清除法测定酶活、SDS-PAGE分析目的蛋白质TAT-SOD的浓度；并采用定量PCR法分析表达菌株的目的基因的mRNA变化规律，从而研究长期保藏重组毕赤酵母菌株表达TAT-SOD的适合性及其条件优化。研究结果表明，摇瓶发酵的最佳条件下（YPDM培养基，体积分数1.0%诱导剂浓度，诱导温度30.0 ℃，初始pH值7.0），发酵液上清酶活水平为753 U/mL，是未优化初始酶活水平的5.1倍，其中pH值优化使TAT-SOD表达水平提高到原始值的3.4倍。7.0的初始诱导pH值的mRNA水平是对照组pH 4.0的3.5倍。这些结果说明，长期保藏的重组毕赤酵母菌株仍然适合表达TAT-SOD，发酵条件会对毕赤酵母的TAT-SOD表达造成显著影响，影响表达水平的最主要因素是目的蛋白质的mRNA水平变化。
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| 关 键 词： | TAT-SOD 巴斯德毕赤酵母 基因表达 发酵 优化 |
Optimization of TAT-SOD Expression Conditions in Long-Term Preserved Recombinant Pichia pastoris |
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| LI Konghan,CHEN Linglin,ZHOU Jiansen,LIU Shutao.Optimization of TAT-SOD Expression Conditions in Long-Term Preserved Recombinant Pichia pastoris[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2020,39(8):51-58. |
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| Authors: | LI Konghan CHEN Linglin ZHOU Jiansen LIU Shutao |
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| Affiliation: | Institute of Biotechnology, Fuzhou University, Fuzhou 350002, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TAT-SOD Pichia pastoris expression fermentation optimization |
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