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利用重组嗜热栖热菌尿苷-胞苷激酶生产尿苷酸
引用本文:范晓光,贾子樊,李国梁,韩洪军,高立栋,张顺棠,李燕军,陈宁.利用重组嗜热栖热菌尿苷-胞苷激酶生产尿苷酸[J].食品与发酵工业,2018(1):7-12.
作者姓名:范晓光  贾子樊  李国梁  韩洪军  高立栋  张顺棠  李燕军  陈宁
作者单位:天津科技大学生物工程学院;莲花健康产业集团股份有限公司博士后科研工作站;
摘    要:尿苷-胞苷激酶(Uridine/cytidine kinase,UCK)作为生物体核苷酸代谢补偿途径中的重要催化剂,可以催化尿苷和胞苷磷酸化成为尿苷酸(5'-uridine monophosphate,5'-UMP)和胞苷酸(5'-cytidine monophosphate,5'-CMP)。利用大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)分别成功克隆表达了来源于嗜热栖热菌(Thermus thermophilus HB8)以及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis 168)的尿苷-胞苷激酶。对比分析了不同重组尿苷-胞苷激酶的催化特性发现,来源于嗜热栖热菌的尿苷-胞苷激酶能以鸟苷三磷酸(Guanosine 5'-triphosphate,GTP)或者腺苷三磷酸(Adenosine 5'-triphosphate,ATP)作为磷酸供体催化尿苷生成尿苷酸,而来源于枯草芽孢杆菌的尿苷-胞苷激酶只有以GTP作为磷酸供体时的催化效果较好。在优化的反应条件下,使用来源于嗜热栖热菌的尿苷-胞苷激酶,6 h可催化10 mmol/L的尿苷和10 mmol/L的ATP生成8.74 mmol/L尿苷酸。研究结果表明,以ATP作为磷酸供体的尿苷-胞苷激酶可作为一种新型的催化剂用于尿苷酸的研制与生产。

关 键 词:尿苷酸  尿苷-胞苷激酶  嗜热栖热菌  枯草芽孢杆菌  大肠杆菌

Production of uridine monophosphate by recombinant uridine/cytidine kinase from Thermus thermophilus
Abstract:
Keywords:
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