α-淀粉酶基因在肠膜明串珠菌基因表达中的应用

目的:为了验证α-amy(α-淀粉酶基因)在肠膜明串珠菌中应用的可行性,构建重组质粒并建立了肠膜明串珠菌的三亲杂交体系。方法:以大肠杆菌-明串珠菌的穿梭载体p CW4为基础,构建了携带α-amy标记的重组质粒p CW7。肠膜明串珠菌ATCC8293(Leuconostoc mesenteroides)的g6ph(6-磷酸葡萄糖脱氢酶基因)表达盒插入到p CW7,并通过三亲杂交转化肠膜明串珠菌而获得重组菌株。结果:重组菌株的甘露醇产量比原始菌株提高了7%。三亲杂交中可以通过α-amy标记筛选重组子。结论:证实了α-amy标记在肠膜明串珠菌中应用的可行性。