一种便宜的荧光寿命测量设备

荧光寿命的测定提供难以从简单强度测量中分辨出的荧光团的重要信息。典型的纳秒范围的寿命是由观察脉冲辐射激励后荧光强度的衰减，或频域法来确定。直到最近，这些方法都还需要昂贵的实验室设备。一种新的数字信号处理锁定放大器，使得可以用相当便宜的通用设备来确定这些短的荧光寿命。} 马里兰巴尔的摩郡大学和马里兰生物工艺研究院的研究人员使用一种锁定放大器来确定荧光寿命。这里蓝光通过光纤输入到一个散发绿荧光的荧光素样品。部分荧光反射回光纤到探测器。锁定放大器分析此荧光来测定样品的荧光寿命 在马里兰巴尔的摩郡大学和马里兰生物工艺研究院，由Goving Rao领导的研究人员研制了一种实验性设备。他们的工作由国家健康研究所及Genentech, Merck和Pfizer资助。 该设备的计算机控制系统包括一个可测量高达200 MHz的SR844 RF锁定放大器，该放大器由加里福尼亚Sunnyvale的斯坦福研究机构提供。激励源是一个低价的蓝光发光二极管，测量辐射用的是R928光电倍增管。锁定放大器调制发光二极管的强度。 频域技术，涉及到相位调制荧光计，已经存在多年。当激励光强度调制时，荧光强度在同一频率也被调制，但其相位出现位移。这个位移反映荧光寿命。纳秒级寿命要求100 MHz的调制频率，直到数值信号处理器问世之前，所用的高频锁相放大器价格高达10万美元。 “频率响应的应用限制在80 MHz和100 MHz之间，”Peter Harms说，“限于蓝光二极管的响应率，难以快速调制。”他说，可以用新的紫光半导体激光取代发光二极管获取更高频率的调制。该系统的优势在于它的标价在10000美元和它的适应性、易操作性。 Harms说，该系统是同类研究工具中的佼佼者。除了价廉，它还足够小，可以在实时工业设备上提供寿命测量。“我们的实验室用寿命测量来检测传感器，这个设备允许我们决定每个化学传感器的最佳频率。若采用单频的话，商业传感系统将会更便宜。”