| 实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 汪先桃,郭变琴,梁勤东,涂植光.实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA方法的建立及初步应用[J].四川激光,2013,34(3). |
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| 作者姓名： | 汪先桃 郭变琴 梁勤东 涂植光 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的:建立实时荧光定量PCR检测长链非编码RNA HULC的方法,探讨其在作为肝癌标志的应用价值.方法:根据Genebank中的HULC lncRNA(AY914050.1)全序列,设计HULC基因的特异引物,构建HULC基因的T克隆载体,命名为pMD18-T-HULC;以pMD18-T-HULC为实时荧光定量PCR检测HULC的标准品,建立实时荧光定量PCR检测HULC的方法并进行方法学评价.应用此方法检测8种肿瘤细胞株、肝癌组织、其它癌及癌旁组织中HULC lncRNA的表达.结果:HULC实时荧光定量PCR检测方法学的最低检测限为1.8× 103拷贝/L,线性范围为1.8× 103拷贝/L至4.6× 109拷贝/L;该法的批内变异系数(CV)＜2.0％,批间CV＜ 8.0％.其在肝癌组织和肝癌细胞株起始表达量为(7.6±3.1)×105拷贝/L至(5.6±3.2)×106拷贝/L,明显高于其它癌和癌旁组织HULC lncRNA表达量(＜1.8×103拷贝/L).新发现膀胱癌细胞株T24中表达量高(6.7±2.4)×105拷贝/L],但在膀胱癌组织中表达低(＜1.8×103拷贝/L).结论:成功建立了实时荧光定量PCR检测HULC lncRNA的方法,HULC lcRNA可望作为肝癌的标志.
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| 关 键 词： | HULC lncRNA 实时荧光定量PCR 肝癌 |
Establishment of the method of real-time fluorescence quantitative PCR detection of HULC lncRNA and its primary application |
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| WANG Xian-tao
,
GUO Bian-qin
,
LIANG Qin-dong
,
TU Zhi-guang.Establishment of the method of real-time fluorescence quantitative PCR detection of HULC lncRNA and its primary application[J].Laser Journal,2013,34(3). |
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| Authors: | WANG Xian-tao GUO Bian-qin LIANG Qin-dong TU Zhi-guang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HULC lncRNA real-time fluorescence quantitative PCR liver cancer |
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