| 食品中幽门螺杆菌荧光PCR快速检测方法的建立及评价 |
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| 引用本文： | 刘静秋,史艳宇,刘金华,邴炜,华蕾,杨波,朱颖,王洪昌.食品中幽门螺杆菌荧光PCR快速检测方法的建立及评价[J].Canadian Metallurgical Quarterly,2011,37(1). |
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| 作者姓名： | 刘静秋 史艳宇 刘金华 邴炜 华蕾 杨波 朱颖 王洪昌 |
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| 作者单位： | 1. 吉林省产品质量监督检验院,吉林,长春,130022
2. 吉林出入境检验检疫局,吉林,长春,130062 |
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| 基金项目： | 国家质量监督检验检疫总局资助课题 |
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| 摘 要： | 目的:建立一种快速、特异、灵敏的幽门螺杆菌检测方法,并对方法进行评价,为快速、准确、有效检测幽门螺杆菌方法的建立提供依据.方法:以尿素酶基因序列为靶位点,用Primer Express 3.0软件设计引物及探针,经Blast软件对相似序列搜索后,筛选出一套最优与常见致病菌无交叉反应的引物;分别用食品中常见致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、沙门菌和空肠弯曲菌DNA进行特异性实验;将计数过的幽门螺杆菌菌悬液与牛奶样品混合液,梯度稀释后分别提取DNA进行荧光PCR扩增,确定检测方法的灵敏度;对人工污染幽门螺杆菌的生奶及生肉样品进行检测验证方法的可行性.结果:利用尿素酶基因设计的引物及探针仅对幽门螺杆菌有扩增曲线,而其他对照以及阴性对照均未有明显扩增曲线;能够对生奶及生肉中污染的幽门螺杆菌进行有效扩增;设计的引物对幽门螺杆菌的检测敏感性可达到3 CFU·mL-1,检测可以在4 d内完成.结论:荧光PCR方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测食品中污染的幽门螺杆菌.
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 尿素酶基因 荧光PCR 食品 |
Establishment and evaluation of real time PCR for detection of Helicobacter pylori in food |
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| LIU Jing-qiu,SHI Yan-yu,LIU Jin-hua,BING Wei,HUA Lei,YANG Bo,ZHU Ying,WANG Hong-chang.Establishment and evaluation of real time PCR for detection of Helicobacter pylori in food[J].Canadian Metallurgical Quarterly,2011,37(1). |
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| Authors: | LIU Jing-qiu SHI Yan-yu LIU Jin-hua BING Wei HUA Lei YANG Bo ZHU Ying WANG Hong-chang |
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