| 腾冲菌脂肪酶的表达纯化及酶学性质的表征 |
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| 引用本文： | 李迅,仲惠,王亮亮,邓若冰,高红,王飞.腾冲菌脂肪酶的表达纯化及酶学性质的表征[J].化工进展,2014(12):3337-3341. |
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| 作者姓名： | 李迅 仲惠 王亮亮 邓若冰 高红 王飞 |
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| 作者单位： | 南京林业大学化学工程学院，江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室，江苏 南京 210037 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目，江苏省高校自然科学研究重大项目，江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)。 |
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| 摘 要： | 将来自腾冲菌的脂肪酶(Lip A)基因(lip A)克隆到大肠杆菌表达载体p ET28a(含T7启动子)和p Trc99A(含Trc启动子)中,转入大肠杆菌表达,发现Trc启动子更适合Lip A的表达。通过热处理和DEAE-Sepharose阴离子柱纯化过程,重组Lip A得到纯化,比酶活达到1.9U/mg,重组Lip A分子量为42k Da。重组Lip A在80℃、p H 4.5时酶活最高,经85℃保温2h,酶活保持60%以上;在p H值4.0~6.0之间,Lip A具有较好的稳定性;Cu2+和Zn2+对酶活力分别有38.9%和69.2%的抑制作用,Mn2+、Co2+和Tween-20对该酶有较大的激活作用;以p-nitrophenyl-laurate(p-NP-C12)为底物时,该酶的Km值为1.5mmol/L,kcat为34.5s-1。
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| 关 键 词： | 腾冲菌 脂肪酶 酶学性质 对硝基苯十二酸酯 |
Expression,purification and characterization of lipase from Thermoanaerobacter tengcongensis |
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| LI Xun,ZHONG Hui,WANG Liangliang,DENG Ruobing,GAO Hong,WANG Fei.Expression,purification and characterization of lipase from Thermoanaerobacter tengcongensis[J].Chemical Industry and Engineering Progress,2014(12):3337-3341. |
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| Authors: | LI Xun ZHONG Hui WANG Liangliang DENG Ruobing GAO Hong WANG Fei |
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| Affiliation: | LI Xun;ZHONG Hui;WANG Liangliang;DENG Ruobing;GAO Hong;WANG Fei;College of Chemical Engineering,Jiangsu Key Lab of Biomass-Based Green Fuels and Chemicals,Nanjing Forestry University; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Thermoanaerobacter tengcongensis lipase enzymatic properties p-nitrophenyl-laurate |
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