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新城疫病毒F_(48)E_8株 HN基因在杆状病毒系统中表达
引用本文:李太元,金宁一,丁壮,王兴龙,殷震.新城疫病毒F_(48)E_8株 HN基因在杆状病毒系统中表达[J].粉末涂料与涂装,2002,15(6):334-336.
作者姓名:李太元  金宁一  丁壮  王兴龙  殷震
作者单位:延边大学农学院动物医学系,延边大学农学院动物医学系,中国人民解放军军需大学研究所,中国人民解放军军需大学研究所,中国人民解放军军需大学研究所 龙井 133400,龙井 133400,长春 130062,长春 130062,长春 130062
基金项目:由国家自然科学基金重大项目(398932904-3)和"863"项目(101-05-03-1)资助.
摘    要:目的 采用新型杆状病毒表达系统(Bac to Bac系统)在昆虫细胞Sf-9中进行新城疫病毒F48 E8株HN基因表达。方法NDV F48 E8株 HN基因插入到转座载体 pFast Bac Ⅰ,构建重组转座载体 pFast HN,转化到感受态细胞 DH10后,将目的基因转座到穿梭载体Bacmid中,经筛选获得重组Bacmid HN转染到Sf-9昆虫细胞,并进行检测。结果 表达产物经SDS-PAGE、Westem blot检测获得蛋白特异带,相对分子质量约63000。结论NDVF48E8株HN基因能通过新型杆状病毒表达系统在昆虫细胞Sf-9中进行表达,表达量约为细胞总蛋白的10%。

关 键 词:新城疫病毒  HN基因    杆状病毒    表达
修稿时间:2002年1月31日

Expression of HN Gene of Newcastle Disease Virus(NDV) Strain F48E8 in Baculovirus
LI Taiyuan,JIN Ningyi,DING Zhuang et al.Expression of HN Gene of Newcastle Disease Virus(NDV) Strain F48E8 in Baculovirus[J].Chinese Journal of Biologicals,2002,15(6):334-336.
Authors:LI Taiyuan  JIN Ningyi  DING Zhuang
Abstract:Objective To express HN gene of Newcastle disease virus(NDV) strain F48E8 in sf- 9 insect cell by a novel baculvirus system(Bac to Bac) .Methods A recombinant transposable vector pFast HN was constructed by inserting HN gene into transposable vector pFast Bac I and transformed into competent cell DN10,then the goal gene was transposed into shuttle vector Bacmid.The recombinant Bacmid HN was screened and transfected to insect cell sf - 9 for expression. Results Both SDS - PAGE and Western blot profiles showed a specific protein band with a relative molecular weight of 63000. Conclusion The HN gene of NDV strain F48E8 could be expressed in insect cell sf- 9 by a novel baculovirus expression system,and the expressed product contained about 10% of total cellular protein.
Keywords:Newcastle disease virus HN gene Baculovirus Expression
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