| 破伤风抗毒素间接ELISA检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 张玲玲,包正琦,张光磊,刘东梅,段丽娟,戴于栋,高建军.破伤风抗毒素间接ELISA检测方法的建立及应用[J].粉末涂料与涂装,2019(4). |
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| 作者姓名： | 张玲玲 包正琦 张光磊 刘东梅 段丽娟 戴于栋 高建军 |
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| 作者单位： | 兰州生物制品研究所有限责任公司 |
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| 摘 要： | 目的建立检测破伤风抗毒素(TAT)效价的间接ELISA法,并进行初步应用。方法用方阵滴定法确定包被抗原和待检血清的最适工作浓度,并对各种反应条件进行优化,建立间接ELISA法。用建立的间接ELISA法检测3批TAT效价,并与小鼠中和试验法检测结果进行比较。结果建立的间接ELISA法的最适反应条件:抗原最适包被质量浓度为1.2μg/m L,血清最佳稀释浓度为400 m IU/m L;抗原与待检血清作用时间为45 min,加入酶标二抗后作用时间为60 min;抗原最适包被缓冲液为0.05 mol/L p H 9.6碳酸盐(CBS)缓冲液,4℃包被12 h;封闭液为30%BSA(5%蔗糖和5%乳糖);酶标二抗最适工作浓度为1∶8 000。3批TAT间接ELISA法效价检测结果与小鼠中和试验法效价检测结果相比,差异无统计学意义(P均0.05)。结论建立的间接ELISA法具有较高灵敏度,可用于TAT效价的检测。
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| 关 键 词： | 破伤风抗毒素 间接ELISA 效价 |
Development and application of an indirect ELISA for tetanus antitoxin |
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