| 检测鹿新孢子虫感染的双抗夹心Dot-ELISA方法的建立及其应用 |
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| 引用本文： | 田来明,杨滨僮,李智鹏,张桐嘉,宫鹏涛,李建华,王全楷,杨举,李赫,张西臣.检测鹿新孢子虫感染的双抗夹心Dot-ELISA方法的建立及其应用[J].粉末涂料与涂装,2015(4):422-425. |
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| 作者姓名： | 田来明 杨滨僮 李智鹏 张桐嘉 宫鹏涛 李建华 王全楷 杨举 李赫 张西臣 |
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| 作者单位： | 吉林大学动物医学学院;长春市农业科学院;吉林农业大学动物科学技术学院 |
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| 摘 要： | 目的建立检测鹿新孢子虫感染的双抗夹心Dot-ELISA方法,并进行初步应用。方法以双抗夹心ELISA方法的A490值对应Dot-ELISA方法显色结果的方式,建立双抗夹心Dot-ELISA方法检测结果判定标准,确定HRP标记的抗犬新孢子虫MIC6单克隆抗体1H11、包被抗体(抗犬新孢子虫MIC6单克隆抗体1A1)、待测血清的最佳工作浓度,并对该方法的特异性、重复性及灵敏度进行验证。用建立的方法检测79份鹿血清,并与双抗夹心ELISA方法进行比较。结果确定该方法 HRP-H11抗体的最佳稀释度为1∶100,包被抗体最适工作浓度为0.3μg/片,待测血清稀释度为1∶8。自然感染犬新孢子虫的鹿阳性血清的敏感性稀释度为1∶64,与弓形虫阳性血清无交叉反应,敏感性、特异性较强;自然感染新孢子虫的鹿阳性血清3次检测结果重复性较好。该方法检测的76份鹿血清中,阳性12份,阳性率为15.2%,与双抗夹心ELISA方法检测结果一致。结论建立的双抗夹心Dot-ELISA方法可用于检测鹿群感染新孢子虫循环抗原,为新孢子虫病的诊断提供了新的方法。
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| 关 键 词： | 新孢子虫 鹿 双抗夹心Dot-ELISA方法 MIC6 |
Development and application of double antibody sandwich Dot-ELISA for Neospora caninum infection in deer |
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