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柱前衍生化RP-HPLC法测定L-叔亮氨酸含量
引用本文:陈亭亭,黄 金,陈蔚青,王 普.柱前衍生化RP-HPLC法测定L-叔亮氨酸含量[J].浙江工业大学学报,2016,44(4):431-434.
作者姓名:陈亭亭  黄 金  陈蔚青  王 普
作者单位:(1.浙江工业大学药学院,浙江杭州310014;2.浙江树人大学生物与环境工程学院,浙江杭州310015)
基金项目:浙江省公益性技术应用研究计划项目(2014C33274)
摘    要:以2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)为手性衍生化试剂,建立一种 反相高效液相色谱测定L-叔亮氨酸的方法.以GITC为衍生化试剂对L-叔亮氨酸进行衍生化,优 化衍生化试剂用量和衍生化时间等反应条件.使用岛津C18 色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)分离 衍生化产物,流动相为V(甲醇)∶V(磷酸盐)=58∶42的缓冲溶液(pH=2.8),流速为0.6mL/ min,检测波长为254nm,柱温30℃,进样量10μL,结果表明叔亮氨酸两个对映异构体的衍生化 产物分离良好,在0.2~1.0mmol/L范围内呈现良好的线性关系(r=0.999 6).该方法准确可靠, 重现性好,适用于L-叔亮氨酸的含量测定.

关 键 词:柱前衍生化  反相高效液相色谱法  L-叔亮氨酸  
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