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大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统的初步研究
引用本文:陈海琴,徐志南,汪诚,廖玉华,岑沛霖.大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统的初步研究[J].浙江大学学报(自然科学版 ),2007,41(5):843-847.
作者姓名:陈海琴  徐志南  汪诚  廖玉华  岑沛霖
作者单位:1.浙江大学 生物工程研究所,浙江 杭州 310027;2.浙江养生堂天然药物研究所,浙江 杭州 310007
基金项目:国家自然科学基金资助项目(20276066).
摘    要:陈海琴,徐志南,汪诚,廖玉华,岑沛霖在近几年来被广泛研究和应用的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中,大肠杆菌抽提物的制备、底物浓度的配比以及能量再生体系的选择是最关键的几个因素.以绿色荧光蛋白(GFP)为报导基因,以缺失核酸酶I基因的大肠杆菌A19为实验菌株,通过对大肠杆菌无细胞抽提物制备过程中菌体收集时间、细胞破碎压力、后处理条件等参数的摸索和确定、无细胞蛋白质合成系统中底物浓度配比的正交实验优化以及系统中能量再生体系的比较和选择,制备得到了GFP表达量为154 μg/mL的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统,与优化前相比产量提高了29倍.

关 键 词:蛋白质  生物合成  无细胞系统  绿色荧光蛋白(GFP)
文章编号:1008-973X(2007)05-0843-05
收稿时间:2006-02-16
修稿时间:2006年2月16日

Preliminary study on preparation of E.coli cell-free system for protein expression
CHEN Hai-qin,XU Zhi-nan,WANG Cheng,LIAO Yu-hua,CEN Pei-lin.Preliminary study on preparation of E.coli cell-free system for protein expression[J].Journal of Zhejiang University(Engineering Science),2007,41(5):843-847.
Authors:CHEN Hai-qin  XU Zhi-nan  WANG Cheng  LIAO Yu-hua  CEN Pei-lin
Abstract:
Keywords:protein  biosynthesis  cell-free system  green fluorescent protein(GFP)
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