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去泛素酶复合体Ubp3/Bre5的制备及与Cdc48作用
引用本文:苏文成,吕操,时丽丽,景晓飞,盖园明,张洁,谭焕波,王鹏举,夏立新,邹培建,秦刚. 去泛素酶复合体Ubp3/Bre5的制备及与Cdc48作用[J]. 深圳大学学报(理工版), 2015, 0(1)
作者姓名:苏文成  吕操  时丽丽  景晓飞  盖园明  张洁  谭焕波  王鹏举  夏立新  邹培建  秦刚
作者单位:1. 天津工业技术大学生物技术学院,天津300457; 中国科学院天津工业生物技术研究所,国家工业酶重点实验室,天津300308
2. 天津药物研究院天津分子设计与药物发现重点实验室,天津,300193
3. 中国科学院天津工业生物技术研究所,国家工业酶重点实验室,天津300308
4. 深圳大学医学部,呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室,深圳518060
基金项目:天津市科技支撑计划资助项目,中国科学院百人计划资助项目,国家自然科学基金资助项目
摘    要:泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中。 Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用。为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆菌中成功表达并纯化重组Ubp3与Bre5单体及Ubp3/Bre5复合体,首次成功大规模制备重组Ubp3/Bre5复合体。通过一系列pulldown实验,检验Ubp3/Bre5与AAA家族中泛素选择性ATP酶Cdc48的相互作用模式,结果发现, Ubp3及Bre5无法单独与Cdc48结合,但Ubp3/Bre5复合体可以有效与Cdc48相互作用。提出了Ubp3/Bre5-Cdc48相互作用的新模式,制备了高质量重组Ubp3/Bre5复合体。该研究为通过生化及结构生物学进行分子机制探索奠定了基础。

关 键 词:结合蛋白质  Ubp3去泛素化酶  结合辅因子Bre5  ATP酶Cdc48  去泛素化复合体  与谷光苷肽巯基转移酶沉淀试验  直接相互作用

Preparation of full-length deubiquitinating complex Ubp3/Bre5 and characterization of interaction with Cdc48
Su Wencheng,Lyu Cao,Shi Lili,Jing Xiaofei,Gai Yuanming,Zhang Jie,Tan Huanbo,Wang Pengju,Xia Lixin,Zou Peijian,Qin Gang. Preparation of full-length deubiquitinating complex Ubp3/Bre5 and characterization of interaction with Cdc48[J]. Journal of Shenzhen University(Science &engineering), 2015, 0(1)
Authors:Su Wencheng  Lyu Cao  Shi Lili  Jing Xiaofei  Gai Yuanming  Zhang Jie  Tan Huanbo  Wang Pengju  Xia Lixin  Zou Peijian  Qin Gang
Abstract:
Keywords:protein binding  deubiquitinase Ubp3  cofactor Bre5  ATPase Cdc48  deubiquitinating complex  GST-pulldown  direct interaction
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
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