| 基于植物p53保守序列构建RNAi的DNA片段方法 |
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| 引用本文： | 高洁,李兴林,张黎明,肖天剑.基于植物p53保守序列构建RNAi的DNA片段方法[J].天津轻工业学院学报,2010(3):19-22,26. |
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| 作者姓名： | 高洁 李兴林 张黎明 肖天剑 |
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| 作者单位： | 工业微生物教育部重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津300457 |
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| 基金项目： | 天津市应用基础及前沿技术研究计划项目（08JCZDTC15300） |
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| 摘 要： | 构建p53基因RNA干涉DNA片段的目的，是将其应用于植物悬浮培养中的细胞周期调节．依据拟南芥p53基因与其他高等植物具有高度保守区域的特点，合成其两个区域的核苷酸片段（Ⅰ和Ⅱ）及其相应的反向片段（Ⅰ＇和Ⅱ＇），并在Ⅱ和Ⅱ＇端部分别引入内含子两个端部核苷酸序列．在相互连接后进行PCR选择扩增，其产物再与克隆裁体连接并经过蓝白斑筛选获得重组DNA；在电泳和核苷酸测序鉴定后表明，最终得到了Ⅰ-5＇-内含子-Ⅱ＇-Ⅱ-内含子-3＇-Ⅰ＇序列的重组DNA片段该片段两端含多克隆位点，通过插入植物的表达载体进入细胞基因组，在细胞中其转录产物将形成发夹结构，经胞内酶切后可以形成短的双链RNA片段，将具有干涉p53基因表达的功能
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| 关 键 词： | 拟南芥 p53基因 保守序列 RNAi片段 |
Construction of p53 Conserved Sequence of Plant-Based RNAi Method of DNA Fragments |
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| GAO Jie,LI Xing-lin,ZHANG Li-ming,XIAO Tian-jian.Construction of p53 Conserved Sequence of Plant-Based RNAi Method of DNA Fragments[J].Journal of Tianjin University of Light Industry,2010(3):19-22,26. |
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| Authors: | GAO Jie LI Xing-lin ZHANG Li-ming XIAO Tian-jian |
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| Affiliation: | (Key Laboratory of Industrial Microbiology,Ministry of Education ,College of Biotechnology, Tianjin University of Science ＆ Technology,Tianjin 300457 ,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Arabidopsis thaliana p53 gene conservative sequences RNAi segments |
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