| 重组人角质细胞生长因子-Ⅰ的聚乙二醇修饰及体外活性 |
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| 引用本文： | 冯一建,陈勇,张增涛,黄程,李红亮,胡春兰,范开.重组人角质细胞生长因子-Ⅰ的聚乙二醇修饰及体外活性[J].重庆工学院学报,2012(4). |
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| 作者姓名： | 冯一建 陈勇 张增涛 黄程 李红亮 胡春兰 范开 |
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| 作者单位： | 重庆理工大学药学与生物工程学院;重庆富进生物医药有限公司; |
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| 基金项目： | 国家科技重大专项资助项目(2012ZX09103-301-052);重庆市自然科学基金资助项目(CSTC2007BB5412) |
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| 摘 要： | 研究大肠杆菌表达的重组人角质细胞生长因子-Ⅰ型N端缺失突变体(△N23KGF-Ⅰ)的mPEG-马来酰亚胺(mPEG-maleimide、mPEG-Mal)修饰工艺及修饰位点和初步体外生物活性。首先修饰得到聚乙二醇化的△N23KGF-Ⅰ,然后对△N23KGF-Ⅰ作还原和非还原质量肽图,确定其各肽段,对△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K做还原质量肽图,确定修饰位点。最后,通过BAF-3细胞对△N23KGF-Ⅰ国际标准品、△N23KGF-Ⅰ、△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K测活。结果表明,在尿素环境下,mPEG-MAl被均一修饰在△N23KGF-I的Cys40位。与国际活性标准品相比,△N23KGF-Ⅰ的活性保留了116%,△N23KGF-Ⅰ-m PEG-Mal-20K的活性保留了36%。
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| 关 键 词： | 重组人角质细胞生长因子 质量肽图 聚乙二醇修饰 |
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