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| 用MicroBCA方法定量检测硅烷化表面固定的纤维连接蛋白 | |
| 引用本文： | 周超,张慧婷,陈俊英,李遂焰,黄楠.用MicroBCA方法定量检测硅烷化表面固定的纤维连接蛋白[J].功能材料,2011,42(11). |
| 作者姓名： | 周超 张慧婷 陈俊英 李遂焰 黄楠 |
| 作者单位： | 1. 西南交通大学生命科学与工程学院,四川成都610031／西南交通大学材料先进技术教育部重点实验室,四川成都610031 2. 西南交通大学材料先进技术教育部重点实验室,四川成都,610031 3. 西南交通大学生命科学与工程学院,四川成都,610031 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2011CB606204); 国家自然科学基金资助项目(30900295); 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(SWJTU09BR206) |
| 摘 要： | 使用microBCA方法（micro-bicinchoninicacid protein assay）,定量研究了人纤维连接蛋白（fi-bronectin,Fn）在硅烷化石英玻璃表面实现共价固定的情况。首先对石英玻璃进行化学清洗,使表面的羟基得以充分暴露。再利用硅烷偶联剂（APTE）将氨基基团引入,并通过EDC/NHS催化体系把人纤维连接蛋白以酰胺键的形式共价固定于该表面。最后用Mi-croBCA方法对该表面固定化的生物分子（Fn）进行量化表征。应用水接触角、X射线光电子能谱（X-rayphotoelectron spectroscopy,XPS）、原子力显微镜（atomic force microscope,AFM）等方法对各步处理效果进行跟踪分析。结果表明Fn在硅烷化石英玻璃表面实现了固定,一定范围内,硅烷化表面的Fn固定量随所使用Fn孵化液浓度的增加而增大。为生物材料表面改性与修饰研究中生物大分子的量化表征提供了一种新方法。 |
| 关 键 词： | MicroBCA 石英玻璃 纤维连接蛋白 定量检测 |
Quantification of immobilized fibronectin by MicroBCA method on silanized surface |
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| ZHOU Chao,ZHANG Hui-ting,CHEN Jun-ying,LI Sui-yan,HUANG Nan.Quantification of immobilized fibronectin by MicroBCA method on silanized surface[J].Journal of Functional Materials,2011,42(11). | |
| Authors: | ZHOU Chao ZHANG Hui-ting CHEN Jun-ying LI Sui-yan HUANG Nan |
| Affiliation: | ZHOU Chao1,2,ZHANG Hui-ting1,CHEN Jun-ying2,LI Sui-yan1,HUANG Nan2(1.School of Life Science and Engineering,Southwest Jiaotong University,Chengdu 610031,China,2.Key Laboratory for Advanced Technologies of Materials,Ministry of Education,China) |
| Abstract: | In this paper,after being sonic cleaned by acetone,ethanol and distilled water,the quartz glass was chemically activated for obtaining hydroxyl functional groups on its surface.Silanization was then performed by incubating the activated quartz glass in 3% solution of(3-aminopropyl)-triethoxysilane(APTE)(from Sigma-Aldrich) in anhydrous alcohol for 12h at room temperature.Fibronectin(Fn) was dissolved in physiology saline water for achieving different concentrations.To immobilize Fn molecule onto the silaniz... |
| Keywords: | MicroBCA quartz glass fibronectin quantification assay |
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