| 条纹斑竹鲨鱼再生肝组织cDNA质粒文库的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 赵艳景,胡亚楠,刘睿,王颖,余江河,叶波平,王旻,吴梧桐.条纹斑竹鲨鱼再生肝组织cDNA质粒文库的构建和鉴定[J].高技术通讯,2005,15(5):82-86. |
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| 作者姓名： | 赵艳景 胡亚楠 刘睿 王颖 余江河 叶波平 王旻 吴梧桐 |
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| 作者单位： | 中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009;中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009 |
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| 基金项目： | 863计划项目 (2 0 0 3AA62 40 90 )，霍英东教育基金会第九届高等院校青年教师基金 (910 3 9)，江苏省自然科学基金创新人才 (BK2 0 0 2 418)资助项目 |
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| 摘 要： | 建立了鲨鱼肝脏的部分切除模型,获得了再生2 4h的鲨鱼肝组织,分离了再生肝组织的总RNA ,纯化了mRNA ,利用含BamHI酶切位点的Oligo(dT) 16 为引物合成cDNA第一链,通过末端转移酶在cDNA第一链3’末端加入Oligo(dC)尾,进而以Oligo(dT) 16 和含HindIII酶切位点的Oligo(dG) 10 为引物,通过LD PCR (long distance PCR)方法合成双链cDNA ,将双链cDNA经BamHI和HindIII双酶切,通过T4 DNA连接酶连接到经相同酶切的pUC19载体后构建成cDNA文库。对文库质量的分析结果表明,通过本方法构建的鲨鱼再生肝组织cDNA文库容量至少为4 .92×10 5个/ μgdscDNA ,重组率达96 .7%。对随机提取30个克隆的质粒进行分析,获得了其中2 5个插入片段的序列,未见重复序列,经与GenBank和dbEST数据库比对分析发现新基因在其中占较大的比例(76 % )。鲨鱼再生肝组织cDNA文库的成功构建为进一步通过差异显示技术筛选、克隆肝再生过程中差异表达的相关功能基因奠定了一个良好的基础。
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| 关 键 词： | 鲨鱼 再生肝组织 cDNA文库 |
Construction and detection of cDNA library of regenerated liver from Chiloscyllium plagiosum |
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| ZHAO Yanjing,Hu Yanan,Liu Rui,Wang Ying,Yu Jianghe,Ye Boping,Wang Min,Wu Wutong.Construction and detection of cDNA library of regenerated liver from Chiloscyllium plagiosum[J].High Technology Letters,2005,15(5):82-86. |
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| Authors: | ZHAO Yanjing Hu Yanan Liu Rui Wang Ying Yu Jianghe Ye Boping Wang Min Wu Wutong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | shark regenerated hepatic tissue cDNA library |
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