新型基因工程抗CD20抗体片段F（ab′）2的构建、表达和活性测定

从抗CD20Fab′表达载体上利用PCR方法扩增并修饰其重键恒定区CH1C－末端的DNA序列，然后将修饰后的CH1DNA序列重组到原Fab′表达载体中，构建成抗CD20抗体片段F(ab′）2表达载体。将该载体转化缩主大肠杆菌16C9，实现了抗CD20抗体片段F(ab′）在工程菌中的可溶性分泌表达。经分离纯化获得具有与抗原CD20特异结合的F（ab′）2在工程菌中的可溶性分泌表达。经分离纯化获得具有与抗原CD20特异结合的F（ab′）2活性片段。竞争性免疫荧光实验的结果表明：抗CD20F(ab′）2片段具有比Fab′更强的竞争性抑制亲本鼠源性单克隆抗体H147与Daudi细胞表面CD20相结合的能力；用MTT法检测所得到的数据说明：F(ab′）2与Fab′更为有效地抑制在体外培养的Daudi细胞的生长。