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牙鲆抗菌肽hepcidin基因在大肠杆菌中的融合表达
引用本文:李伟,陈松林.牙鲆抗菌肽hepcidin基因在大肠杆菌中的融合表达[J].高技术通讯,2007,17(7):765-770.
作者姓名:李伟  陈松林
作者单位:1. 中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003;中国水产科学院黄海水产研究所,农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,青岛,266071
2. 中国水产科学院黄海水产研究所,农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室,青岛,266071
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划) , 国家高技术研究发展计划(863计划) , 国家自然科学基金
摘    要:根据从实验室克隆的牙鲆抗菌肽hepcidin基因(GenBank登陆号DQ129693)的序列,设计了特异性引物,PCR扩增其成熟肽片段.重组至融合表达载体pGEX-4T-1中,构建成牙鲆抗菌肽hepcidin基因融合表达载体pGEX-fhep,转化至大肠杆菌BL21(DE3)plyS中,筛选得到的阳性克隆用IPTG进行诱导.SDS-PAGE电泳显示在29kD处有特异性的蛋白条带出现,Western-blotting 检测表明已经成功表达了融合蛋白,表达的融合蛋白最高占总蛋白的21%.纯化得到的GST-fhep用凝血酶切割后,用亲合层析得到牙鲆的抗菌肽hepcidin.抑菌实验结果表明抗菌肽对大肠杆菌(ATCC25922)有一定程度的抑制作用.

关 键 词:牙鲆  抗菌肽  hepcidin  大肠杆菌  表达  活性
收稿时间:2006-02-07
修稿时间:2006年2月7日

Fusion expression of hepcidin gene from Paralichthys olivaceus in Escherichia Coli
Li Wei,Chen Songlin.Fusion expression of hepcidin gene from Paralichthys olivaceus in Escherichia Coli[J].High Technology Letters,2007,17(7):765-770.
Authors:Li Wei  Chen Songlin
Affiliation:1 College of Marine Life Science, Ocean University of China, Qingdao 266003;2. Key Lab for Sustainable Utilization of Marine Fisheries Resources, Ministry of Agriculture, Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071
Abstract:
Keywords:Paralichthys olivaceus  antimicrobial peptides  hepcidin  E  coli  exprssion  activity
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