抗辐射菌Deinococcus radiodurans一种新的DNA修复基因pprA的分子克隆测序及特性研究(英文)

抗辐射菌Ｄｅｉｎｏｃｏｃｕｓｒａｄｉｏｄｕｒａｎｓ具有显著的ＤＮＡ修复能力，包括对丝裂霉素（ＭＣ），紫外线（ＵＶ）及γ射线。通过化学诱导野生型菌株ＫＤ８３０１而得到的突变体ＫＨ３１１１，对ＭＣ，ＵＶ及γ射线敏感，对链霉素（Ｓｍ）具有抗性。ＫＨ３１１１的辐射抗性能够通过转染野生型抗辐射菌ＫＤ８３０１基因组中一个已被克隆的ＤＮＡ片断而得到恢复。转染实验表明，突变体具有很好的自然转化能力，即不缺乏重组修复能力。本研究确定了ＫＨ３１１１内发生突变的基因及其核苷酸序列，该基因（ｏｒｆ１４４ｂ）所编码的蛋白质由２８４个氨基酸组成，与其它已知的蛋白质不具有同源性，即它是一种新的蛋白质。通过ＤＮＡ测序分析，ＫＤ８３０１和ＫＨ３１１１的ｏｒｆ１４４ｂ序列只是一个碱基的改变，即由Ｇ突变为Ａ，所编码的第１４９位氨基酸由甘氨酸变为谷氨酰胺。说明甘氨酸是ＤＮＡ修复基因ｏｒｆ１４４ｂ所编码的蛋白质中的一个重要残基。用ＫＤ８３０１的ｏｒｆ１４４ｂ基因转染ＫＨ３１１１，得到转染体ＫＨ３１１２，其对ＭＣ，ＵＶ及γ射线都具有同母本（ＫＤ８３０１）一样的抗性。在抗辐射菌中，这种对多种ＤＮＡ损伤剂产生抗性所需要的基因（ｏｒｆ１４４ｂ），我们命名为

COLNING, SEQUENCING AND CHARACTERIZATION OF A NOVEL DNA REPAIR GENE PPRA FROM THE RADIORESISTANT BACTERIUM DEINOCOCCUS RADIODURANS