GⅡ型诺如病毒微滴式数字RT-PCR检测方法的建立及初步应用 |
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引用本文: | 管锦绣,翁文川,许喜林,凌莉,冼钰茵,易蓉,李志勇.GⅡ型诺如病毒微滴式数字RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J].现代食品科技,2018,34(5):222-228. |
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作者姓名: | 管锦绣 翁文川 许喜林 凌莉 冼钰茵 易蓉 李志勇 |
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作者单位: | 华南理工大学食品科学与工程学院;广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
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基金项目: | 广州市科信委项目(2014J4500027) |
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摘 要: | 为了建立快速准确的GⅡ型诺如病毒定量检测方法,本研究将微滴式数字RT-PCR技术应用于GⅡ型诺如病毒检测中,并与实时荧光RT-PCR法进行了比对。微滴式数字RT-PCR反应退火温度的优化实验确定了其最佳退火温度为56℃,实时荧光RT-PCR和微滴式数字RT-PCR两种方法的灵敏度实验对比表明微滴式数字RT-PCR法检测GⅡ型诺如病毒的灵敏度为5.40 copies/μL,其灵敏度高于实时荧光RT-PCR法,重复性实验对比表明两种方法在检测中间浓度的GⅡ型诺如病毒时重复性均较好;人工污染西生菜实验中表明微滴式数字RT-PCR法最低检测限为54.00 copies/μL。本研究建立的GⅡ型诺如病毒的微滴式RT-PCR检测方法,灵敏度高,重复性良好,在人工污染西生菜GⅡ型诺如病毒的检测中表现理想,具有良好的应用前景。
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关 键 词: | 实时荧光RT-PCR 微滴式数字RT-PCR GⅡ型诺如病毒 灵敏度 重复性 西生菜 |
收稿时间: | 2017/11/18 0:00:00 |
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