| 双重LAMP技术快速检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的方法学研究 |
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| 引用本文： | 相兴伟,郑斌,顾丽霞,周向阳,周秀锦,邵宏宏,胡兴娟,周宇芳.双重LAMP技术快速检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的方法学研究[J].现代食品科技,2017,33(1):253-260. |
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| 作者姓名： | 相兴伟 郑斌 顾丽霞 周向阳 周秀锦 邵宏宏 胡兴娟 周宇芳 |
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| 作者单位： | （1.浙江省海洋开发研究院，浙江舟山 3160001）,（1.浙江省海洋开发研究院，浙江舟山 3160001）,（2.浙江海洋学院，浙江舟山 316000）,（3.舟山出入境检验检疫局，浙江舟山 316000）,（3.舟山出入境检验检疫局，浙江舟山 316000）,（3.舟山出入境检验检疫局，浙江舟山 316000）,（3.舟山出入境检验检疫局，浙江舟山 316000）,（1.浙江省海洋开发研究院，浙江舟山 3160001） |
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| 基金项目： | 浙江省公益技术研究农业项目（2015C32101）；浙江省分析测试科技计划项目(2014C37093)；国家科技支撑项目(2012BAD29806)；浙江省公益技术研究农业项目（2016C32081）；浙江省分析测试科技计划项目(2014C37108) |
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| 摘 要： | 建立环介导等温扩增技术(LAMP)同时快速检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的方法。针对副溶血性弧菌tox R和霍乱弧菌omp W基因设计特异性引物,优化反应条件,建立水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的检测方法,并同时应用双重LAMP技术和PCR技术对实验菌株进行副溶血性弧菌和霍乱弧菌检测,比较两种方法的特异性和灵敏度。LAMP的最佳反应温度为61℃,在此条件下,双重LAMP检测技术检测副溶血性弧菌和霍乱弧菌DNA的敏感度可达3.12 fg,且与其他常见的细菌株无交叉反应,特异性为100%;对模拟食品样品进行直接检测时检测限为50 cfu/m L;对60份水产样品进行检测时,6份样品出现LAMP及PCR阳性,而传统培养方法检测出4份阳性。实验结果表明所建立的双重LAMP技术在检测水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌时灵敏度、特异性高,时间成本低,适合于水产品中副溶血性弧菌和霍乱弧菌的快速检测。
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| 关 键 词： | 副溶血性弧菌 霍乱弧菌 同时检测 |
| 收稿时间： | 2015/12/24 0:00:00 |
Study on Simultaneous Detection of Vibrio Parahaemolyticus and Vibrio Cholerae in Aquatic Products by Loop-Mediated Isothermal Amplification Method |
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| XIANG Xing-wei,ZHENG Bin,GU Li-xi,ZHOU Xiang-yang,ZHOU Xiu-jin,SHAO Hong-hong,HU Xing-juan and ZHOU Yu-fang.Study on Simultaneous Detection of Vibrio Parahaemolyticus and Vibrio Cholerae in Aquatic Products by Loop-Mediated Isothermal Amplification Method[J].Modern Food Science & Technology,2017,33(1):253-260. |
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| Authors: | XIANG Xing-wei ZHENG Bin GU Li-xi ZHOU Xiang-yang ZHOU Xiu-jin SHAO Hong-hong HU Xing-juan and ZHOU Yu-fang |
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| Affiliation: | (1.Zhejiang Marine Development Research Institute, Zhoushan 316001, China),(1.Zhejiang Marine Development Research Institute, Zhoushan 316001, China),(2.Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316000, China),(3.Zhoushan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Zhoushan 316000, China),(3.Zhoushan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Zhoushan 316000, China),(3.Zhoushan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Zhoushan 316000, China),(3.Zhoushan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Zhoushan 316000, China) and (1.Zhejiang Marine Development Research Institute, Zhoushan 316001, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vibrio parahaemolyticus Vibrio cholerae simultaneous detection |
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