| 基于CRISPR-Cas13的单增李斯特菌RNA快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 曾红棱,张婷,邓锐杰,任尧,贾利蓉.基于CRISPR-Cas13的单增李斯特菌RNA快速检测方法的建立[J].现代食品科技,2021,37(5):256-261. |
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| 作者姓名： | 曾红棱 张婷 邓锐杰 任尧 贾利蓉 |
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| 作者单位： | 四川大学轻工科学与工程学院,四川成都 610065 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（22074100；31701565）；成都市科技项目（2019-YF05-01380-SN） |
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| 摘 要： | 为实现食品中单增李斯特菌污染的快速检测,本研究构建了一种基于CRISPR-Cas系统和Broccoli适配体的RNA均相检测技术。利用Cas 13与cr RNA锚定序列结合形成识别元件cr RNA-Cas13复合物,靶标RNA存在时可激活Cas 13的非特异性RNase活性,并利用点亮型RNA适配体Broccoli作为信号探针,监测cr RNA此-Cas13的活化状态。荧光值的变化与单增李斯特菌浓度存在线性关系,利用来检测单增李斯特菌。本研究所构建的检测可在30min内完成对于单增李斯特菌的的识别与检测,检出限为148CFU/m L,对细菌具有良好的检测特异性,可区分大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和蜡样芽孢杆菌。在牛奶模型中单增李斯特菌的加标回收率为95.15%～97.99%。该方法具有较好的灵敏度、特异性,可直接靶向检测致病菌RNA,无需逆转录、PCR扩增和核酸标记,简化了实验流程,对于实现食品中单增李斯特菌的现场检测及生物安全控制具有重要意义。
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| 关 键 词： | 单增李斯特菌 CRISPR-Cas13 快速检测 食品安全 |
| 收稿时间： | 2021/2/1 0:00:00 |
Establishment of A Rapid RNA Detection Method for Listeria monocytogenes Based on CRISPR-Cas13 |
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| ZENG Hong-ling,ZHANG Ting,DENG Rui-jie,REN Yao,JIA Li-rong.Establishment of A Rapid RNA Detection Method for Listeria monocytogenes Based on CRISPR-Cas13[J].Modern Food Science & Technology,2021,37(5):256-261. |
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| Authors: | ZENG Hong-ling ZHANG Ting DENG Rui-jie REN Yao JIA Li-rong |
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| Affiliation: | (College of Biomass Science and Engineering Sichuan University, Chengdu 610065, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Listeria monocytogenes CRISPR- Cas13 rapid detection food safety |
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