| 免疫磁珠分离-实时荧光PCR快速检测虾中沙门氏菌 |
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| 引用本文： | 李亚茹,周冬根,夏杏洲,曹怡芳,杨慧宁,胡双芳,肖性龙.免疫磁珠分离-实时荧光PCR快速检测虾中沙门氏菌[J].现代食品科技,2017,33(11):235-242. |
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| 作者姓名： | 李亚茹 周冬根 夏杏洲 曹怡芳 杨慧宁 胡双芳 肖性龙 |
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| 作者单位： | （1.华南理工大学食品科学与工程学院，广东广州 510640）,（2.宁波检验检疫科学技术研究院，浙江宁波 315012）,（3.广东海洋大学食品科技学院，广东湛江 524094）,（1.华南理工大学食品科学与工程学院，广东广州 510640）,（1.华南理工大学食品科学与工程学院，广东广州 510640）,（1.华南理工大学食品科学与工程学院，广东广州 510640）,（1.华南理工大学食品科学与工程学院，广东广州 510640） |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金项目（2016A030313449）；广东省科技计划项目（2015A030401025）；浙江省自然科学基金项目（LY16H260004）；广东省省部产学研合作重大专项（2013A090100014） |
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| 摘 要： | 建立了免疫磁珠分离(Immunomagnetic separation,IMS)联合实时荧光PCR(real time PCR)快速、灵敏地检测虾中沙门氏菌的方法。用纳米磁珠与抗沙门氏菌多克隆抗体制备免疫磁珠,优化反应条件,建立IMS方法。同时针对沙门氏菌ttr基因合成探针和引物,构建real time PCR体系,选4株代表性的沙门氏菌检测其特异性和灵敏度。结果显示,免疫磁珠的最适添加量为100μL,免疫磁珠与样品菌液的最佳反应时间为30 min。建立的免疫磁珠分离-实时荧光PCR(IMS-real time PCR)方法特异性高,对于虾中沙门氏菌的检测限为鼠伤寒沙门氏菌5×10~1 CFU/25 g,猪霍乱沙门氏菌5×10~2 CFU/25 g,肠炎沙门氏菌和甲型副伤寒沙门氏菌1×10~2CFU/25 g,检测全程可在6 h内完成。对40份实际样品,IMS-real time PCR方法与国标法检测结果完全一致。建立的IMS-Real time PCR方法用时短、灵敏度高,为水产品中沙门氏菌的快速检测提供了技术支撑,对沙门氏菌引起的食源性疾病的预防和控制具有现实意义。
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| 关 键 词： | 免疫磁珠分离 实时荧光PCR 沙门氏菌 检测 |
| 收稿时间： | 2017/5/20 0:00:00 |
Rapid Detection of Salmonella in Shrimp by Immunomagnetic Separation Combined with Real-time PCR |
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| LI Ya-ru,ZHOU Dong-gen,XIA Xing-zhou,CAO Yi-fang,YANG Hui-ning,HU Shuang-fang and XIAO Xing-long.Rapid Detection of Salmonella in Shrimp by Immunomagnetic Separation Combined with Real-time PCR[J].Modern Food Science & Technology,2017,33(11):235-242. |
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| Authors: | LI Ya-ru ZHOU Dong-gen XIA Xing-zhou CAO Yi-fang YANG Hui-ning HU Shuang-fang and XIAO Xing-long |
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| Affiliation: | (1.College of Food Sciences and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China),(2.Ningbo Academy of Inspection and Quarantine, Ningbo 315012, China),(3.College of Food Science and Technology, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524094, China),(1.College of Food Sciences and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China),(1.College of Food Sciences and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China),(1.College of Food Sciences and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) and (1.College of Food Sciences and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | immunomagnetic separation real-time polymerase chain reaction salmonella detection |
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