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大西洋三文鱼和虹鳟鱼双重PCR检测方法的建立及应用
引用本文:黄曼虹,熊雄,许文杰,李壹,操敏,熊晓辉.大西洋三文鱼和虹鳟鱼双重PCR检测方法的建立及应用[J].现代食品科技,2020,36(12):274-282.
作者姓名:黄曼虹  熊雄  许文杰  李壹  操敏  熊晓辉
作者单位:南京工业大学食品与轻工学院,江苏南京211816,南京工业大学食品与轻工学院,江苏南京211816,南京工业大学食品与轻工学院,江苏南京211816,南京工业大学食品与轻工学院,江苏南京211816,南京工业大学食品与轻工学院,江苏南京211816,南京工业大学食品与轻工学院,江苏南京211816;江苏省食品安全快速检测公共技术服务中心,江苏南京211816
基金项目:国家自然科学青年基金项目(31701688)
摘    要:为了实现大西洋三文鱼和虹鳟鱼的物种掺假快速检测,本研究建立了一种基于双重PCR(普通和荧光)的物种鉴定方法。通过序列分析,分别基于线粒体COⅠ和Cyt b基因设计大西洋三文鱼和虹鳟鱼特异性引物,验证引物的特异性并对双重PCR反应体系进行优化,建立大西洋三文鱼和虹鳟鱼的双重PCR快速鉴定方法。利用本研究设计的引物,仅大西洋三文鱼和虹鳟鱼可以分别扩增出108 bp和207 bp的特异性条带,而其他23种非目标物种均未有扩增条带。经验证,在双重PCR反应体系中,大西洋三文鱼和虹鳟鱼引物的最佳添加量分别为0.1和0.4 μmol/L,熔解温度分别约为81.5 ℃和85 ℃。利用该方法从29份市售“三文鱼”样品中检测到6份大西洋三文鱼和3份虹鳟鱼,且与DNA条形码比对结果一致。本研究建立的大西洋三文鱼和虹鳟鱼双重PCR(普通和荧光)鉴定方法具有良好的特异性和适用性,为大西洋三文鱼和虹鳟鱼物种鉴定提供了可靠的技术手段。

关 键 词:大西洋三文鱼  虹鳟鱼  双重PCR  掺假  物种鉴定
收稿时间:2020/6/23 0:00:00

Development and Validation of a Duplex PCR for the Simultaneous Detection of Atlantic Salmon (Salmo salar) and Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss) in Processed Fish Products
HUANG Man-hong,XIONG Xiong,XU Wen-jie,LI Yi,CAO Min,XIONG Xiao-hui.Development and Validation of a Duplex PCR for the Simultaneous Detection of Atlantic Salmon (Salmo salar) and Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss) in Processed Fish Products[J].Modern Food Science & Technology,2020,36(12):274-282.
Authors:HUANG Man-hong  XIONG Xiong  XU Wen-jie  LI Yi  CAO Min  XIONG Xiao-hui
Affiliation:(1.College of Food Science and Light Industry, Nanjing Tech University, Nanjing 211816, China); (1.College of Food Science and Light Industry, Nanjing Tech University, Nanjing 211816, China) (2.Jiangsu Public Technical Service Center for Rapid Detection of Food Safety, Nanjing 211816, China)
Abstract:
Keywords:Salmo salar  Oncorhynchus mykiss  duplex PCR  adulteration  species identification
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