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SYBR(R) GreenⅠ实时PCR快速检测沙门菌
引用本文:王耀,郑秋月,曹际娟.SYBR(R) GreenⅠ实时PCR快速检测沙门菌[J].中国食品卫生杂志,2006,18(4).
作者姓名:王耀  郑秋月  曹际娟
摘    要:为应用SYBR(R) Green Ⅰ实时PCR技术建立沙门菌的快速检测方法,根据沙门菌invA基因序列的特点设计特异性引物,进行SYB(R) Green Ⅰ实时PCR检测.以沙门菌及非同源性参考菌株做特异性检测;沙门菌不同群菌株做重现性检测;将沙门菌菌株稀释成不同梯度,做灵敏度检测.该方法有较好的特异性、重现性,沙门菌属5个群菌株均为阳性,而其它非同源菌株均为阴性.该方法灵敏度较高,检测低限为19 CFU/ml.该方法特异性强,重现性好,敏感性高,可以快速、准确检测食品中沙门菌.应用实时PCR技术,利用SYBR(R) Green Ⅰ染料能选择性结合双链DNA的特点,可检测到沙门菌中inv A基因特异性靶序列扩增所产生的荧光信号,且通过熔解曲线可知其熔点值约为80.4℃,而对其它非沙门菌则检测不到荧光信号.SYBR(R) Green Ⅰ实时PCR能通过熔解曲线有效地区分特异性产物、非特异性产物以及引物二聚体,是基因鉴定检测的新方法.

关 键 词:聚合酶链反应  沙门氏菌属  基因

Identification of Salmonella in Foods with SYBR(R) Green Ⅰ Real Time PCR
WANG Yao,ZHENG Qiu-yue,CAO Ji-juan.Identification of Salmonella in Foods with SYBR(R) Green Ⅰ Real Time PCR[J].Chinese Journal of Food Hygiene,2006,18(4).
Authors:WANG Yao  ZHENG Qiu-yue  CAO Ji-juan
Abstract:
Keywords:
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