| 大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的重组表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 宋柬,马会勤,郝佳,任发政,陈尚武.大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在大肠杆菌中的重组表达及活性鉴定[J].食品科学,2006,27(7):29-35. |
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| 作者姓名： | 宋柬 马会勤 郝佳 任发政 陈尚武 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业大学食品科学与营养工程学院,教育部-北京市功能乳品重点实验室,北京,100083
2. 中国农业大学农学与生物技术学院果树学系,北京,100094 |
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| 摘 要： | 利用基因重组技术,克隆了大豆(Glycinemax(L.)Merr.)的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase,PAL)全基因,构建pET-GMPAL工程表达质粒,在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达,并利用细胞裂解液得到的粗酶液转化L-苯丙氨酸生成肉桂酸。通过8%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,获得了分子量在77.9kD的一条蛋白质特异表达带,特异蛋白质表达量达到总蛋白质含量的8%左右。通过初步发酵,获到具有PAL活性的粗酶液裂解液,粗酶的比活力达到211.7μmol/gpro·min(3529μkat/kg),高于红酵母PAL和欧芹重组PAL表达的比活力。结果表明克隆重组的大豆PAL基因通过表达质粒pET-GMPAL在E.coli中能高效地表达为有催化功能的高活力酶。
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| 关 键 词： | 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 基因克隆 重组表达 肉桂酸 |
| 文章编号： | 1002-6630（2006）07-0029-07 |
| 收稿时间： | 2006-04-19 |
| 修稿时间： | 2006-04-19 |
Expression and Activity Assay of Recombinant Phenylalanine Ammonia Lyase of Glycine max L. in E. coli |
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| SONG Jian,MA Hui-qin,HAO Jia,REN Fa-zheng,CHEN Shang-wu.Expression and Activity Assay of Recombinant Phenylalanine Ammonia Lyase of Glycine max L. in E. coli[J].Food Science,2006,27(7):29-35. |
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| Authors: | SONG Jian MA Hui-qin HAO Jia REN Fa-zheng CHEN Shang-wu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pET-31b( ) |
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