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SDS-PAGE-薄层扫描联用法测定3种不同来源的乳铁蛋白
引用本文:邢志恩,王军,戴蕴青,陈燕卉,陈敏.SDS-PAGE-薄层扫描联用法测定3种不同来源的乳铁蛋白[J].食品科学,2011,32(16):274.
作者姓名:邢志恩  王军  戴蕴青  陈燕卉  陈敏
作者单位:中国农业大学食品科学与营养工程学院;
基金项目:转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08007-001)
摘    要:目的:建立快速、简便测定鲜牛奶、转基因牛奶和人乳中乳铁蛋白的方法。方法:在对样品脱脂和去除酪蛋白时,水洗乳脂、酪蛋白以提高乳铁蛋白的回收率。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分离乳清蛋白,薄层扫描法定量。对电泳和薄层扫描的条件进行优化,电泳使用1.0mm×10齿的试样格、分离胶质量浓度12g/mL、分离电压100V、上样量5μL、染色3h、脱色2h;薄层扫描采取锯齿、双波长、透射的扫描方式,Y步长和摆幅宽分别为0.1mm和8mm。结果:可以分离不同来源乳中的乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白;乳铁蛋白加标回收率分别为104.53%、108.37%,同板精密度RSD值为3.1003%和1.8151%,在100~2000μg/mL范围内呈线性关系,相关系数为0.9988和0.9990。结论:此方法可以用于3种乳中乳铁蛋白的测定。

关 键 词:牛乳铁蛋白  重组人乳铁蛋白  十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)  薄层扫描  

Determination of Lactoferrin from Different Sources by SDS-PAGE Followed by Thin Layer Chromatography Scanning
XING Zhi-en,WANG Jun,DAI Yun-qing,CHEN Yan-hui,CHEN Min.Determination of Lactoferrin from Different Sources by SDS-PAGE Followed by Thin Layer Chromatography Scanning[J].Food Science,2011,32(16):274.
Authors:XING Zhi-en  WANG Jun  DAI Yun-qing  CHEN Yan-hui  CHEN Min
Affiliation:XING Zhi-en,WANG Jun,DAI Yun-qing,CHEN Yan-hui,CHEN Min(College of Food Science and Nutritional Engineering,China Agricultural University,Beijing 100083,China)
Abstract:
Keywords:bovine lactoferrin  recombinant human lactoferrin  sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)  thin layer chromatography scanning  
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