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双抗夹心ELISA检测食品中大肠杆菌O157:H7方法研究
引用本文:葛萃萃,钟青萍,张旺,欧阳鑫.双抗夹心ELISA检测食品中大肠杆菌O157:H7方法研究[J].食品科学,2007,28(1):171-175.
作者姓名:葛萃萃  钟青萍  张旺  欧阳鑫
作者单位:华南农业大学食品学院,广东,广州,510640
摘    要:研究获得纯化抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体,经检测10mg/ml纯化IgY抗体的效价为1:320:以大肠杆菌O157:H7免疫新西兰大耳白兔,获得兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体,效价达1:25600。以兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体稀释3200倍作为捕获抗体,抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体为检测抗体建立双抗夹心ELISA方法检测大肠杆菌O157:H7,正交试验分析表明,捕获抗体于37℃包被2h、不封闭、抗原与捕获抗体于37℃结合2h、检测抗体浓度为0.25mg/ml、与抗原于37℃结合1h为最优反应条件。该方法对纯培养菌液检出限为105CFU/ml,具有良好的敏感性及特异性。染菌样品经在EC增菌液中选择性培养后进行双抗夹心ELISA检测,接种量为0.1~1CFU/g(ml)的样品在培养12h后可检出阳性反应,1~10CFU/g(ml)的样品在培养8h后可检出阳性反应。

关 键 词:大肠杆菌O157:H7  双抗夹心ELISA  检测
文章编号:1002-6630(2007)01-0171-05
修稿时间:2005-11-22

Study on Double-antibody Sandwich ELISA for Detecting E.coli O157 in Food
GE Cui-cui,ZHONG Qing-ping,ZHANG Wang,OUYANG Xin.Study on Double-antibody Sandwich ELISA for Detecting E.coli O157 in Food[J].Food Science,2007,28(1):171-175.
Authors:GE Cui-cui  ZHONG Qing-ping  ZHANG Wang  OUYANG Xin
Affiliation:College of Food Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510640, China
Abstract:
Keywords:E  coli O157  double-antibody sandwich ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)  detect
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