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组成型过表达ido基因对4-羟基异亮氨酸合成的影响及其发酵培养基的响应面优化
引用本文:何继龙,李英滋,韩世宝,满德恩,郭脉海,战俊杰,张成林.组成型过表达ido基因对4-羟基异亮氨酸合成的影响及其发酵培养基的响应面优化[J].食品科学,2019,40(14):91-98.
作者姓名:何继龙  李英滋  韩世宝  满德恩  郭脉海  战俊杰  张成林
作者单位:1.天津科技大学生物工程学院,天津 300457;2.菱花集团有限公司,山东 济宁 272073
基金项目:国家自然科学基金青年科学基金项目(31300069);国家自然科学基金面上项目(31770053);中国博士后科学基金项目(2017M611170;2018T110662);天津市科技计划项目(17YFZCSY01050);天津科技大学青年教师创新基金项目(2016LG07)
摘    要:为考察组成型过表达异亮氨酸羟化酶(isoleucine dioxygenase,IDO)基因ido对4-羟基异亮氨酸合成的影响,构建ido组成型表达质粒pXM01-ido及菌株HIL017,其ido转录量及IDO活性较诱导型过表达菌株HIL016显著提升,4-羟基异亮氨酸产量较HIL016提高19.4%。为进一步提高4-羟基异亮氨酸产量,通过Plackett-Burman试验确定HIL017发酵培养基中玉米浆、谷氨酸和FeSO4·7H2O用量为主要影响因素,利用最陡爬坡试验和响应面法确定其最优用量为玉米浆34.1 mL/L、谷氨酸2.98 g/L、FeSO4·7H2O 0.016 7 g/L,此时4-羟基异亮氨酸理论产量为5.57 g/L。验证实验结果表明,最佳条件下4-羟基异亮氨酸产量为5.53 g/L,较优化前提高19.7%。

关 键 词:4-羟基异亮氨酸  异亮氨酸羟化酶  谷氨酸棒杆菌  组成型过表达  响应面法

Effect of Constitutively Overexpressed ido Gene on 4-Hydroxyisoleucine Production and Optimization of the Fermentation Medium by Response Surface Methodology
HE Jilong,LI Yingzi,HAN Shibao,MAN De’en,GUO Maihai,ZHAN Junjie,ZHANG Chenglin.Effect of Constitutively Overexpressed ido Gene on 4-Hydroxyisoleucine Production and Optimization of the Fermentation Medium by Response Surface Methodology[J].Food Science,2019,40(14):91-98.
Authors:HE Jilong  LI Yingzi  HAN Shibao  MAN De’en  GUO Maihai  ZHAN Junjie  ZHANG Chenglin
Affiliation:1. College of Biotechnology, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China; 2. Linghua Group Co. Ltd., Jining 272073, China
Abstract:
Keywords:4-hydroxyisoleucine  isoleucine dioxygenase  Corynebacterium glutamicum  constitutive overexpression  response surface methodology  
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