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Bacillus sphaericus DS11蛋白酶基因osp在Bacillus subtilis的异源表达及酶学性质研究
引用本文:柴金龙,胡晟源,陈丽,王淑军,焦豫良,杨杰,刘姝,房耀维.Bacillus sphaericus DS11蛋白酶基因osp在Bacillus subtilis的异源表达及酶学性质研究[J].食品研究与开发,2020,41(12):8-13.
作者姓名:柴金龙  胡晟源  陈丽  王淑军  焦豫良  杨杰  刘姝  房耀维
作者单位:江苏海洋大学海洋生命与水产学院,江苏连云港222005;江苏省海洋资源开发研究院,江苏连云港222005;江苏海洋大学海洋资源与环境学院,江苏连云港222005
基金项目:国家自然科学基金项目(31772016);江苏省海洋科技创新专项(HY2018-10);江苏省“六大人才高峰”第十二批高层次人才项目(swyy-195);江苏省“333高层次人才培养工程”;连云港市“521工程”项目;江苏省研究生科研与实践创新计划项目(SJCX19_0954)
摘    要:将Bacillus sphaericus 2297蛋白酶基因osp在Bacillus subtilis WB800异源表达,并进行纯化和酶学性质研究。以Bacillus sphaericus DS11基因组DNA为模板,扩增osp基因,构建重组质粒pMA0911-His_6-osp,重组质粒转化Bacillus subtilis WB800获得重组表达菌株Bacillus subtilis WB800-pMA0911-His_6-osp。利用镍离子柱亲和层析纯化重组酶至电泳纯。重组酶最适催化温度和pH值分别为40℃和pH 8.0,在20℃~30℃下保温10 h保持80%以上酶活力,在pH 7.0~9.0处理24 h保持60%以上酶活力;Sr~(2+)、K~+、Mg~(2+)对酶活有促进作用,Fe~(3+)、Ba~(2+)、Ca~(2+)对酶活有抑制作用;重组蛋白酶在极性常数为0.8~3.1的有机溶剂中孵育6 d后保持53%以上的酶活力。

关 键 词:Bacillus  sphaericus  DS11  蛋白酶  异源表达  有机溶剂稳定性  酶学性质
收稿时间:2019/6/18 0:00:00

Expression and Characterization of Protease Gene osp of Bacillus Sphaericus DS11 in Bacillus Subtilis
CHAI Jin-long,HU Sheng-yuan,CHEN Li,WANG Shu-jun,JIAO Yu-liang,YANG Jie,LIU Shu,FANG Yao-wei.Expression and Characterization of Protease Gene osp of Bacillus Sphaericus DS11 in Bacillus Subtilis[J].Food Research and Developent,2020,41(12):8-13.
Authors:CHAI Jin-long  HU Sheng-yuan  CHEN Li  WANG Shu-jun  JIAO Yu-liang  YANG Jie  LIU Shu  FANG Yao-wei
Abstract:
Keywords:
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