大青叶提取物对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用

以大青(Clerodendrum cyrtophyllum Turcz)叶乙醇提取物和石油醚相、二氯甲烷相、乙酸乙酯相、正丁醇相、水相分级萃取物为研究对象,探讨其对肝细胞酒精性损伤的保护作用。采用酒精诱导人肝癌细胞(HepG2)氧化应激建立酒精性肝细胞损伤模型,通过噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同浓度大青叶醇提物和五相萃取物预处理对HepG2细胞酒精性损伤后存活率的影响,以2,7-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(2,7-dichlorofuorescin diacetate,DCFH-DA)探针法测定细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,二硫代二硝基苯甲酸5,5'-Dithiobis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB]法检测还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,水溶性四唑盐(water-soluble tetrazolium,WST)法检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力。结果显示,大青叶醇提物和乙酸乙酯相、正丁醇相、水相萃取物可以明显提高HepG2细胞酒精性损伤后的存活率,通过抵御细胞内ROS生成,降低MDA浓度的方式对细胞进行保护,通过提高细胞内抗氧化物GSH含量和抗氧化酶SOD活力来恢复细胞抗氧化能力,石油醚相和二氯甲烷相无明显作用效果。综上,大青叶醇提物能够抵御HepG2细胞的酒精性损伤,具有护肝功能性食品应用研究价值;乙酸乙酯相、正丁醇相、水相是其有效部位,尤其是乙酸乙酯相,可以作为大青叶中天然抗氧化剂的主要研究对象。