| 氨基甲酸乙酯水解酶异源表达及酶学性质分析 |
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| 引用本文： | 高孝,高洁,刘晓宇,王中选,刘庆涛,桑亚新.氨基甲酸乙酯水解酶异源表达及酶学性质分析[J].食品研究与开发,2022,43(10):195-201. |
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| 作者姓名： | 高孝 高洁 刘晓宇 王中选 刘庆涛 桑亚新 |
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| 作者单位： | 河北农业大学食品科技学院，河北 保定 071000；安徽工程大学生物与食品工程学院，安徽 芜湖 241000 |
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| 基金项目： | 国家十三五重点研发计划（2017YFC1601704）；雪莲菌发酵乳中高加索乳杆菌和酿酒酵母的共生机制（C2021204061） |
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| 摘 要： | 将合成的来源于长孢洛德酵母菌（Lodderomyces elongisporus）属的氨基甲酸乙酯水解酶基因在大肠杆菌中实现异源表达，并进行纯化及其酶学性质研究。摇床培养后酶的比活力为4.52 U/mg，经过镍离子亲和层析柱纯化至显示单一条带后酶的比活力为9.86U/mg。酶学性质研究表明，氨基甲酸乙酯水解酶的最适反应温度为30℃；最适pH值为7.0；金属离子Mg2+对该水解酶的酶活有微弱的促进作用，而Cu2+以及Fe3+对酶的活性有强烈的抑制作用；对低含量的乙醇溶液与NaCl溶液有一定的耐受性；并且该水解酶可以对不同底物的酰胺类化合物进行有效降解，以氨基甲酸乙酯（ethyl carbamate，EC）为底物进行反应时测得水解酶的动力学参数Km值为6.64 mmol/L，最大反应速率Vmax值为8.24 μmol/min。
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| 关 键 词： | 氨基甲酸乙酯 氨基甲酸乙酯水解酶 异源表达 酶学性质 长孢洛德酵母菌 |
| 收稿时间： | 2021/11/10 0:00:00 |
Heterologous Expression and Enzymatic Properties of Recombinant Urethanase |
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| GAO Xiao,GAO Jie,LIU Xiao-yu,WANG Zhong-xuan,LIU Qing-tao,SANG Ya-xin.Heterologous Expression and Enzymatic Properties of Recombinant Urethanase[J].Food Research and Developent,2022,43(10):195-201. |
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| Authors: | GAO Xiao GAO Jie LIU Xiao-yu WANG Zhong-xuan LIU Qing-tao SANG Ya-xin |
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