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产磷脂酶D工程菌构建及发酵条件优化
引用本文:刘琦,张海洋,李雪晗,刘振,孙建安,毛相朝.产磷脂酶D工程菌构建及发酵条件优化[J].食品研究与开发,2022,43(11):26-34.
作者姓名:刘琦  张海洋  李雪晗  刘振  孙建安  毛相朝
作者单位:1.中国海洋大学 食品科学与工程学院,山东 青岛 266003;2.青岛海洋科学与技术国家试点实验室/海洋药物与生物制品功能实验室,山东 青岛 266003
基金项目:国家重点研发计划(2019YFD0901901);山东省自然科学基金(ZR2020JQ15)
摘    要:该研究构建产磷脂酶D(phospholipase D,PLD)的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)工程菌,比较4个单启动子(PHpaII、Pylb(F4)、P2069m、P43)对PLD酶活的影响,摇瓶发酵表明启动子PHpaII酶活最高,为0.32 U/mL。进一步以此工程菌作为发酵菌株,通过单因素试验和响应面试验,对该菌株产PLD的发酵条件进行优化。结果表明最佳产酶条件为接种量2.5 mL/dL、发酵温度37℃、硫酸铵质量浓度0.8 g/dL、甘油质量浓度1.94 g/dL、酵母粉质量浓度1.93 g/dL,在此发酵条件下发酵12.5 h,PLD的酶活达到0.85 U/mL,比出发菌株提高62.5%。同时,以环戊基甲醚作为有机相,柠檬酸-柠檬酸钠为水相,利用双相反应体系合成磷脂酰葡萄糖苷(phosphatidyl-glucose,PtdGlc)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)和磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol,PG),转化率分别为94.8%、94.0%和87.1%。结果表明,该研究构建的枯草芽孢杆菌工程菌经过发酵条件优化后,制备的PLD具有较好的转酯活性,显示出良好的应用潜力。

关 键 词:磷脂酶D  枯草芽孢杆菌  启动子  发酵优化  转磷脂酰化反应
收稿时间:2022/2/9 0:00:00

Engineering Phospholipase D-Producing Strains of Bacillus subtilis and Optimization of Fermentation Conditions
LIU Qi,ZHANG Hai-yang,LI Xue-han,LIU Zhen,SUN Jian-an,MAO Xiang-zhao.Engineering Phospholipase D-Producing Strains of Bacillus subtilis and Optimization of Fermentation Conditions[J].Food Research and Developent,2022,43(11):26-34.
Authors:LIU Qi  ZHANG Hai-yang  LI Xue-han  LIU Zhen  SUN Jian-an  MAO Xiang-zhao
Abstract:
Keywords:
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