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| 重组葡萄糖脱氢酶的酶学性质及其偶联辅酶再生 | |
| 引用本文： | 余涛,胡蝶,邬敏辰,汪俊卿,冯峰,顾颖.重组葡萄糖脱氢酶的酶学性质及其偶联辅酶再生[J].食品与生物技术学报,2014,33(9):910-916. |
| 作者姓名： | 余涛 胡蝶 邬敏辰 汪俊卿 冯峰 顾颖 |
| 作者单位： | 1. 江南大学药学院,江苏无锡,214122 2. 江南大学生物工程学院,江苏无锡,214122 3. 江南大学无锡医学院,江苏无锡,214122 |
| 摘 要： | 为解决生物催化氧化还原反应中辅酶循环问题,人工合成密码子优化后的嗜酸热源体Thermoplasma acidophilum葡萄糖脱氢酶基因Sygdh,于E.coli BL21(DE3)中表达,粗酶液经镍柱亲和层析获得纯化的重组葡萄糖脱氢酶SyGDH。SDS-PAGE显示相对分子质量为41.0 kDa。酶学性质分析表明:该酶的最适pH值为7.5,在pH 6.0~8.0稳定;最适反应温度为40℃,在55℃以下稳定;最适条件下其比活性达4.5 U/mg;Zn2+对其有明显激活作用;该酶对NADP+的亲和力大于NAD+且对大多数有机溶剂有良好的耐受性;对D-葡萄糖的Km和Vmax值分别为28.2 mmol/L和6.5 U/mg。在葡萄糖脱氢酶与羰基还原酶偶联构建的NADPH辅酶循环体系中,以4-氯乙酰乙酸乙酯为底物,羰基还原酶催化产物4-氯-3-羟基丁酸乙酯的产率为99.0%,是未添加葡萄糖脱氢酶时产物产率的3.11倍,表明重组SyGDH具有为生物催化氧化还原反应提供辅酶NADPH再生的能力。 |
| 关 键 词： | 葡萄糖脱氢酶 酶学性质 羰基还原酶 辅酶循环 生物催化 |
Enzymatic Characterization and Coenzyme Regeneration of a Recombinant Glucose 1-Dehydrogenase |
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| YU Tao,HU Die,WU Minchen,WANG Junqing,FENG Feng and GU Ying.Enzymatic Characterization and Coenzyme Regeneration of a Recombinant Glucose 1-Dehydrogenase[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2014,33(9):910-916. | |
| Authors: | YU Tao HU Die WU Minchen WANG Junqing FENG Feng and GU Ying |
| Affiliation: | YU Tao;HU Die;WU Minchen;WANG Junqing;FENG Feng;GU Ying;School of Pharmaceutics Science,Jiangnan University;School of Biotechnology,Jiangnan University;Wuxi Medical School,Jiangnan University; |
| Abstract: | |
| Keywords: | Glucose 1-dehydrogenase enzymatic characterization carbonyl reductase coenzyme cycle biocatalysis |
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